鼻咽癌病人线粒体DNA变异的研究

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目的:研究表明线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变可能在人体老化、细胞的退行性变以及肿瘤的形成过程中起着非常重要的作用.MtDNA的变异包括点突变和大片段缺失,其中线粒体DNA4977bp大片段缺失最为常见,又称为"共同性缺失"(the common deletion),在许多疾病和肿瘤组织中均有发现.该研究通过定量检测鼻咽癌患者血清中线粒体DNA水平,和定性分析鼻咽癌组织中线粒体DNA4977bp大片段缺失的情况,以明确线粒体DNA的变异与鼻咽癌发生发展的关系.材料和方法:收集2001年9月至2002年8月在中山大学肿瘤防治中心门诊随诊的鼻咽癌患者的血清150例,其中有明确临床分期病例124例,早期病例(Ⅰ+Ⅱ)为44例,晚期病例(Ⅲ+Ⅳ)为80例.有远处器官转移的鼻咽癌患者的血清24例,和在我中心进行体检的正常人血清149例.用荧光定量PCR方法检测鼻咽癌病人与正常人血清中mtDNA的含量.收集了81例鼻咽癌组织及其配对的34例外周血和48例鼻咽黏膜慢性炎症病变组织,鼻咽癌组织中,临床分期Ⅰ期7例,Ⅱ期19例,Ⅲ期39例,Ⅳ期为16例.我们运用PCR技术和测序的方法对鼻咽癌组织及外周血和鼻咽黏膜慢性炎组织中的mtDNA4977bp缺失的情况进行研究.结论:1.鼻咽癌病人血清mtDNA水平较正常人血清中mtDNA水平显著降低,伴随远处器官转移的病人血清mtDNA水平则显著高于无远处器官转移的病人,提示鼻咽癌病人其血清mtDNA水平在不同的发展阶段有变化.2.鼻咽癌组织中mtDNA4977bp的缺失率(88.9﹪)高于鼻咽黏膜慢性炎组织中的mtDNA4977bp的缺失率(72.6﹪)和白细胞mtDNA4977bp缺失率(26.5﹪);在不同临床分期的鼻咽癌病例中,晚期病例(Ⅲ+Ⅳ)鼻咽癌组织mtDNA4977bp缺失率(94.6﹪)显著高于早期病例(Ⅰ+Ⅱ)鼻咽癌组织mtDNA4977bp的缺失率(76.0﹪).提示鼻咽癌病人线粒体基因组不稳定性在早期就已经发生,并逐步积累,可能参与了鼻咽癌的发生发展.3.该实验研究结果表明,无论是鼻咽癌病人血清mtDNA浓度,还是鼻咽癌组织中的mtDNA4977bp的缺失率,均和正常人都有显著性差异,并且在鼻咽癌不同发展阶段,也有显著性差异,提示mtDNA的变异可能对鼻咽癌发生发展有一定作用.
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