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背景结节性硬化症（Tuberous sclerosis complex ,TSC, OMIM 191100）是一种常染色体显性遗传神经皮肤综合症,临床表现为癫痫发作、智力低下以及皮肤、脑、肾脏、心脏和肺的错构瘤样增生。对西方人群进行流行病学调查显示TSC的发病率为1:6000～1:10000,其中约2/3为散发病例,提示本病有较高的自发突变率。TSC具有遗传异质性,致病基因有两个,分别是定位于染色体9q34.3的TSC1基因和定位于染色体16p13.3的TSC2基因。迄今共报道突变631个,其中TSC1基因突变位点有150个,TSC2基因突变位点有481个（http://www.hgmd.org/）。大量突变分析发现80%的TSC患者能检测到突变,其中80%无家族史TSC患者和50%有家族史的TSC患者突变发生在TSC2基因上。TSC1基因突变类型主要以点突变、小片段的缺失及小片段的插入为主;而TSC2基因较常发生大片段的缺失及基因重组。TSC1基因和TSC2基因均参与mTOR信号通路和WNT/β-CATENIN信号通路,从而影响细胞的增殖和粘附。虽然国内外学者对TSC基因突变进行了大量的研究,但基因型与表型的关系并不明确。目的检测3例中国汉族无家族史TSC患者的基因突变,为基因诊断和遗传咨询提供科学依据。方法收集3例中国汉族无家族史TSC患者及其家庭成员和100名健康对照的外周血样标本,利用改良盐析法提取外周血白细胞中的DNA,设计覆盖TSC1和TSC2基因所有外显子编码区及其侧翼的65对引物,通过PCR反应扩增和直接测序进行序列分析。结果3例TSC患者的基因突变均位于TSC2基因上:患者ⅠTSC2基因上第268位胞嘧啶（C）被胸腺嘧啶（T）替换（c.268C > T）,导致90位谷氨酰胺处提前出现终止密码子（p.Q90X）;患者ⅡTSC2基因上第5227位胞嘧啶（C）被胸腺嘧啶（T）替换（c.5227C >T）,导致第1743位精氨酸被色氨酸替代（p.R1743W）,该突变刚好位于TSC2基因所编码马铃薯球蛋白的转导活化区2和钙依赖性调节蛋白结合区两个功能区上;患者ⅢTSC2基因第3271位与3272位碱基之间插入TCCG四个碱基（c.32713272insTCCG）,其后密码子发生移位（p.G1091fs）,导致TSC2基因的第3501位碱基后出现终止密码。这3个突变在这3例TSC患者中存在,而在其家庭中的正常个体及100名无关正常对照中不存在相应的突变,证明了这3个突变是致病性突变而非正常多态性。本次报道的3个TSC2基因突变中,无义突变c.268C > T（p. Q90X）和错义突变c. 5227C >T （p. R1743W）国外曾有报道,本研究首次在中国汉族人中得以证实,插入突变c.32713272insTCCG（p.G1091fs）系国内外首次报道。结论无义突变c.268C > T（p. Q90X）、错义突变c. 5227C >T （p. R1743W）和插入突变c.32713272insTCCG（p.G1091fs）可能是导致这3例TSC患者临床表型的主要原因。