林可霉素发酵工艺及膜分离技术的研究

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林可霉素又称洁霉素,是于1962年在林肯链霉菌的发酵代谢产物中分离得到的一种广谱抗生素。林可霉素对革兰氏阳性菌有高效的抗性,它是通过作用于细菌核糖体50S亚基,抑制肽链延长,影响蛋白质的合成而达到其杀灭细菌的效果。林可霉素和其它的抗生素之间不存在交叉耐药性,其本身毒性也低且价格低廉,因此,林可霉素及其衍生物在医疗卫生行业被广泛使用,是一种被国内外制药企业重点生产的抗生素。本文通过研究林可霉素发酵及分离提取两个方面,以期能够提高林可霉素的产量,降低生产成本。在林可霉素的发酵工艺研究中,一方面通过考察在林可霉素发酵的中后期空气流量的降低对林可霉素发酵的影响,结果表明,在88h时将空气流量最低能降低到1:0.4,降得再低就会对林可霉素的发酵产生较大影响,但再在144h时将空气流量降低到1:0.2则对林可霉素的发酵影响较小;另一方面通过考察在基础培养基和补糖中逐步用液化液代替液化糖对Streptomyces lincolnensis 13生长及林可霉素发酵效价的影响,结果表明,仅在基础培养基中用液化液代替液化糖时,在发酵前期菌丝生长没使用液化糖的好,在中后期则生长的更好,林可霉素的释放也更快,最终发酵效价提高了8.6%,而在基础培养基和补糖中都用液化液代替液化糖,比仅在基础培养基用液化液代替液化糖的效果更好,最终发酵效价提高了12.4%。在林可霉素的分离提取方面,针对林可霉素现有提取工艺中大多数采用板框过滤工艺,其存在工作强度大、过滤速度慢、不连续、效率低等缺点,而滤液质量不能得到保障,致使后续工艺不稳定,而陶瓷膜分离技术具有机械强度高、耐酸碱性强、在常温下易操作、能连续操作、分离精度高、过滤速度快、过滤液澄清、易清洗再生、使用寿命长等优点,因而尝试采用陶瓷膜过滤林可霉素发酵液。在采用陶瓷膜过滤林可霉素发酵液时,系统研究了林可霉素发酵液过滤工艺条件。结果表明,采用50nm孔径的陶瓷膜,过膜压差为0.15MPa,膜面流速为4m/s,浓缩至3.5倍时加入1倍量原液的水洗滤,膜平均通量达134~140L/(h·m2),林可霉素收率达97%以上;采用先碱后酸的清洗顺序,膜通量恢复率在95%以上。
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