珍珠明目滴眼液质量控制及治疗干眼症的药效及作用机理研究

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目的:1.珍珠明目滴眼液主要是由是珍珠液与冰片配伍而成,其药理作用的发挥主要与珍珠液和(或)珍珠层粉中游离氨基酸的含量或种类密切相关,因此,有必要对珍珠明目滴眼液发挥药效的主要物质成分进行质量控制研究。2.珍珠明目滴眼液具有清热泻火、养肝明目的功效,临床主要应用于视力疲劳症、慢性结膜炎等,目前针对其用于治疗干眼炎症的研究报道较少,因此,有必要考察其对干眼症的治疗效果,揭示其作用机理。方法:1.采用HPLC法,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用Venusil-AA氨基酸分析柱(250 mm × 4.6 mm,5μm);流动相为 0.1 mol·L-1 醋酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(93:7),及流动相为乙腈-水(4:1),进行梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,紫外检测波长254 nm,柱温38℃,采用HPLC法,检测珍珠明目滴眼液中游离氨基酸的含量。2.采用Schirmer-Ⅱ法、角结膜荧光素染色、泪膜蛋白结晶蕨类试验及酶联免疫吸附法,分别考察兔眼泪液分泌量、角结膜上皮细胞损伤程度、泪膜蛋白结晶状态及眼结膜细胞炎症程度,研究珍珠明目滴眼液治疗干眼症的药效及作用机制。结果:1.HPLC法检测不同厂家珍珠明目滴眼液中游离氨基酸,实验重现性良好,检测结果准确、可靠,珍珠明目滴眼液中包含17种游离氨基酸;检测并分析出甘氨酸、精氨酸、酪氨酸及亮氨酸为主要游离氨基酸成分。2.珍珠明目滴眼液能够促进干眼兔泪液分泌,提高眼表上皮细胞损伤修复,保护泪膜蛋白结晶形态完整性,降低眼表细胞炎症;珍珠明目滴眼液治疗干眼的药效物质为珍珠液或珍珠层粉液与冰片液。结论:1.不同厂家珍珠明目滴眼液中游离氨基酸的种类与含量差异较大,其中天天明与珍视明中游离氨基酸的种类与含量较为稳定,氨基酸谱带含量变化趋势比较一致,其中甘氨酸、精氨酸、酪氨酸及亮氨酸等游离氨基酸的含量可作为质量控制的关键点。2.珍珠明目滴眼液具有调节眼表泪液分泌功能,及调节眼表角结膜抗氧化反应功能;珍珠明目滴眼液治疗干眼症的作用机制可能是促进眼表泪液分泌,提高眼表抗氧化损伤能力,且发挥上述功能的关键物质成分可能是精氨酸、甘氨酸及酪氨酸等。
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