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目的:研究电针联合应用嗅鞘细胞移植治疗大鼠脊髓损伤(SCI)时脊髓运动功能的恢复、病理形态学的改变情况以及它们之间的相互关系。以此来判断两者联合应用的效果、及其是否较应用单一处理因素能更好的使损伤轴突得到再生并对再生轴突产生导向性作用,使脊髓功能得到一定程度的恢复,电针和嗅鞘细胞是否在修复脊髓损伤过程中产生协同作用及其可能的作用机制,为临床上脊髓损伤的治疗提供理论依据。
方法:健康雌性2.5个月龄雌性SD大鼠4只,体重100±30g,用于进行OECs培养纯化。健康雌性SD大鼠72只,体重150±30g,采用随机分组法分成4组后,用自制改良的脊髓打击器打击后加锐性横断伤造成脊髓损伤模型。分为四组,A组-空白组,共18只,于造模后常规饲养;B组-OECs移植组,共18只,于造模后1周注射嗅鞘细胞;C组-电针组,共18只,于造模后1天进行电针刺激督脉穴、体穴,隔天1次,每次30分钟;D组-电针于OECs联合组,共18只,在B组基础上加用C组电针治疗。造模后1天、1W、2W、3W、5W、9W,应用改良的BBB评分法评价治疗前后损伤大鼠神经功能改善状况;分别于造模后2W、3W、5W、9W于每组中随机抽取3只,应用水合氯醛腹腔注射麻醉处死,心脏灌洗后取出损伤处脊髓组织,免疫组化测定GAP-43变化。
结果:1)于造模后1 d、1W、2W、3W、5W、9W时行BBB评分,造模后第1d各组评分均为0分,1W时各组大鼠后肢均有恢复,但评分较低,各组间无差异(P>0.05);2W时B组、C组、D组评分高于A组有显著性差异(P<0.05);3W、5W、9W时评分D组明显高于B组、C组有显著性差异(P<0.05)。2)分别于第2W、3W、5W、9W进行生长先关蛋白GAP-43免疫组化测定,2W时各组含量均开始升高但无显著性差;3W、5W时B组、C组、D组含量高于A组有显著性差异(P<0.01),D组高于B组、C组有显著性差异(P<0.05);9W各组含量均下降,各组之间无明显差异(P>0.05)。3)B组、C组、D组并发症较A组轻。
结论:通过BBB评分及GAP-43检测,推断电针联合OECs移植在治疗大鼠脊髓损伤处轴突生长存在协同作用,可使脊髓神经功能得到更大程度的改善。