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本实验以毛皮动物作为研究外源性cAMP对毛囊作用的在体模型,用cAMP组合剂对周岁安哥拉山羊、初生陕北绒山羊、妊娠90~110日龄的滩羊、70~90日龄的北极狐和新生昆明小鼠进行皮下注射处理。通过分析采集的毛样和皮肤样品,研究外源性cAMP对个体生长发育和毛囊发育及毛囊活性的影响,并探讨其可能的作用途径及机理。 为了进一步了解外源性cAMP作用于毛囊细胞的途径和机理,成功地培养了大鼠触须和人头皮毛囊的毛母质细胞,大鼠触须的毛乳头细胞和小鼠触须及人胚胎头皮毛囊的外根鞘细胞,建立了大鼠触须和人头皮毛母质细胞系,及C57BL/6小鼠触须和人胚毛囊外根鞘细胞系。研究了外源性cAMP对培养的这几种毛囊细胞的影响,探讨了可能的机制。实验结果如下: 一、cAMP组合剂对毛皮动物和小鼠个体发育,毛囊发育及毛囊活性的影响 1.外源性cAMP能促进毛皮动物和小鼠的个体发育 (1)一定剂量的外源性cAMP使安哥拉山羊公羊和母羊的体重分别净增加22.4%和28.1%,差异显著(P<0.05);妊娠滩羊所产羔羊的初生重和45日龄活重分别增加12%和19.8%,差异极显著(P<0.01);6-7月龄的北极狐绝对净增重提高131.4%,差异极显著(P<0.001);使2月龄昆明小鼠体重增加6~32%,差异极显著(P<0.01)。 (2)外源性cAMP促进昆明小鼠性腺发育 通过ICC检测,45日龄小鼠的睾丸精原细胞和卵巢颗粒细胞增殖旺盛。 (3)外源性cAMP促进了北极狐松果腺的发育 2.外源性cAMP能促进毛皮动物和小鼠的毛囊发育。一定剂量的外 源性cAMP使单位面积内毛囊数目增加,如安哥拉山羊单位面积内毛囊数 目增加80%左右,绒山羊增加46%,差异显著①<0刀1h 小鼠皮肤厚度增 加,毛囊长度和毛球直径增加。 3.外源性cAMP能提高毛囊活性。 实验结果证明,一定剂量的外源性cAMP能使安哥拉山羊公羊和母羊 的原毛产量提高79.1%和叩.9%,差异极显著或显著o0.们或k0.os); 毛纤维伸直长度净增加 10.8%;使周岁陕北绒山羊的原绒产量提高28.2%, 差异极显著伊功.01),使绒长净增加12.2%;的日龄滩羊羔羊皮张花型评分 等级提高43%;使安哥拉山羊羊毛纤维绝对强度提高13%,差异显著 ①功刀5>干死毛比例大幅下降达刀。8%,差异极显著O<0.01);促进32日 龄昆明小鼠毛囊中毛母质细胞和毛乳头细胞增殖。 二、大鼠触须和人头皮毛母质细胞培养体系的建立。 在国内外首次建立了大鼠触须和人头皮毛母质细胞培养体系,研究了 细胞的形态特征和基本的细胞动力学参数,并进行了ICC的鉴定,在本实 验的培养条件下,dMC和 hallC的分别可传 6代和 11代。 三、外源性CAMP对培养毛翼细胞的影晌 在国内外首次证实外源性cA郴能促进毛囊细胞的增殖。 l。外源性cAMP对培养大鼠触须和人头皮毛母质细胞的影响 高、中、低三个浓度的外源性cAMP均能促进细胞增殖,中浓度对 hHMC作用最强,试验组细胞数比对照组增加 3.35倍。低浓度为 1.85 倍,高浓度兼有促增殖和促分化作用。 2.外源性。AMP对培养大鼠触须毛乳头细胞增殖的影响 高、中、低三个浓度的外源性cAMP均有促增殖作用,但以低浓度 效果最佳,试验组细胞数是对照组的l.83倍,中浓度为1.33倍,高浓度试 验组与对照组相比差异不明显。 3.cAMP对培养人胚胎和小鼠触须毛囊外根鞘细胞增殖的影响 高、中、低三个浓度的外源性cAMP均有促增殖作用,低浓度作用最 佳,试验组hFORS细胞数为对照组的1,5倍,mORS为3刀7倍,中、 高浓度的效果依次递减。 据椎测,外源性cAMP可能通过多条途径作用于机体和毛囊。结果提 Vll示外源性cAMP是一种毛囊生长发育的促进剂。