基因编辑山羊生产中的胚胎移植技术研究

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基因编辑是当前发展最为迅速的生物技术之一,对动物育种工作进程的加快意义重大,利用基因编辑技术制备出了数量、类型丰富的基因编辑动物。然而,在基因编辑动物制备过程中仍然存在生产效率低等问题亟需解决,核心在于基因编辑技术实施与胚胎移植技术的衔接。本研究以基因编辑绒山羊及子午岭黑山羊制备为契机,深入研究了基因编辑动物制备过程中胚胎移植技术开展的注意事项。结果表明:1对82只陕北绒山羊进行了超数排卵处理,82只羊全部发情,发情去栓间隔时间28.1±8.53 h,发情持续时间31.6±6.45 h。冲胚后统计平均黄体数14.65个,平均可获得胚胎数11.72枚。其中,重复使用供体羊在所获得的平均黄体数、胚胎数及胚胎回收率方面均较低于首次冲胚羊。采用插管法所获得的胚胎数(P<0.01)和胚胎回收率显著优于直接回收法。最后一次配种与胚胎回收间隔时间超过20 h效果明显优于间隔时间在15-20 h组(P<0.05)。回收胚胎数超过20枚后其注射后的胚胎发育数明显高(P<0.05)。2对50只供体子午岭黑山羊超数排卵,有效处理46只,平均黄体数为14.08个/只,平均可获得胚胎数10.82枚/只。方法1在所获得的黄体数、回收胚胎数和胚胎回收率等方面明显优于方法2(P<0.05)。同期处理受体陕北白绒山羊98只,有效受体74只,单黄体受体26只,双黄体受体19只,三黄体受体12只,四个以上黄体受体17只。海绵栓+PMSG 250单位+国产FSH 33单位+PG组处理后效果最好,同期发情率和有效移植率均最高。移植受体74只,平均3.56枚胚胎/羊,移植后受胎率20.27%,产羔率126.67%。供体与受体同时发情结束至供体发情结束早于受体发情结束16 h以内胚胎移植后效果最好,在移植妊娠率、产羔率等方面均最高。3本研究对51只基因编辑陕北白绒山羊进行超排处理,4只未发情(第1组1只;第2组2只,第3组1只),其余均正常发情。其中,撤栓距发情时间第3组最短(16.44±9.04 h);发情持续期第3组最短(29.33±5.66 h);所获黄体数第2组最多(17.18±8.71枚);所得胚胎数第3组最多(平均8.78枚)。综合可知,影响基因编辑羊生产过程中的因素众多,在协调好各个方面的因素后可望更进一步提高基因编辑羊的生产效率,为我国畜牧业科学快速发展奠定基础。
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