【摘 要】
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目的:耳鸣是一种发病机制不明的临床上常见疾病,最广泛的模型是应用水杨酸盐建立的动物模型。本研究通过慢性腹腔注射水杨酸钠建立大鼠耳鸣模型,对耳鸣大鼠中枢相关区域超微结构、神经元代谢功能以及可塑性相关蛋白表达进行系统的研究,以探讨中枢可塑性在耳鸣机制中的作用。方法:大鼠随机分为生理盐水对照组、急性注射组、慢性注射（耳鸣）组及恢复组共四组。通过听觉惊跳反射间隔前刺激抑制实验（GPIAS）检测各组大鼠耳鸣
【基金项目】
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国家自然科学基金（81371091;81170917）； 上海市教委重点基金（12ZZ103）；
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目的:耳鸣是一种发病机制不明的临床上常见疾病,最广泛的模型是应用水杨酸盐建立的动物模型。本研究通过慢性腹腔注射水杨酸钠建立大鼠耳鸣模型,对耳鸣大鼠中枢相关区域超微结构、神经元代谢功能以及可塑性相关蛋白表达进行系统的研究,以探讨中枢可塑性在耳鸣机制中的作用。方法:大鼠随机分为生理盐水对照组、急性注射组、慢性注射（耳鸣）组及恢复组共四组。通过听觉惊跳反射间隔前刺激抑制实验（GPIAS）检测各组大鼠耳鸣样行为以筛选耳鸣动物。利用透射电镜观察下丘、听皮层、海马及小脑的突触超微结构;采用micro PET观察这四个脑区的18F-FDG标准摄取值（SUV）,以测定该脑区的神经元功能活动情况;通过Real-time PCR及Western-Blotting检测听皮层中BDNF、pro BDNF、Trk B、CREB及p-CREB的表达,了解这些可塑性相关蛋白的变化。结果:1)慢性注射组均检测出耳鸣样行为,视为耳鸣动物,其余三组未检测出耳鸣样行为。2)慢性注射组的大鼠下丘、听皮层及海马突触出现囊泡数量上升（P<0.01）、突触后致密区增厚（下丘P<0.01,听皮层P<0.05）、突触曲率增加（P<0.05）以及突触活性区增长（P<0.01）。而海马（HP）则出现了囊泡数量上升（P<0.01）以及突触曲率增加（P<0.05）,突触后致密区及突触活性区未见显著差异（P>0.05）。急性注射组各脑区仅出现囊泡数量上升（P<0.01）,对照组和恢复组无显著差别。3)慢性注射组的大鼠下丘、听皮层及海马脑区与对照组相比,平均SUV值显著上升（P<0.05）,急性注射组出现全脑平均SUV值上升（P<0.01）。4)耳鸣大鼠听皮层BDNF及p-CREB与对照组相比出现表达上升（P<0.05）。pro BDNF,Trk B及CREB的表达在四组间未出现显著性差异（P>0.05）。结论:通过慢性腹腔注射水杨酸钠可成功建立耳鸣模型,并且耳鸣在停止注射14天后消失,提示耳鸣为可逆性,而急性注射组未出现耳鸣样行为。慢性注射组的大鼠下丘、听皮层及海马突触出现传递效能增加及神经递质释放上升的改变,这些脑区的神经元出现代谢活跃状态,表明中枢可塑性使这些脑区的神经元结构和功能都出现变化。急性注射组中上述脑区的突触仅观察到大量神经递质的释放,影像学显示全脑活跃状态,提示可能处于急性应激状态。BDNF可能参与了耳鸣大鼠听皮层中枢可塑性变化的调控过程,其表达上升可能通过CREB磷酸化的增加来实现,在耳鸣机制中起到了重要的作用。
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