有效部位桑酚碱的制备工艺研究

来源 :南京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xndrz1985
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糖尿病是指血中胰岛素绝对或相对不足,导致血糖过高,出现糖尿,进而引起脂肪和蛋白质代谢紊乱。随着人们生活水平的日益提高,糖尿病人的比例也逐渐增多,已成为继心脑血管疾病、肿瘤之后的又一重大疾病。西药治疗糖尿病效果不错,但其副作用也较大。而传统中药桑叶自古就有治疗糖尿病的记载。本文以中药桑叶作为研究对象,通过提取纯化得到桑叶四个部位。同时通过药理实验筛选出桑叶总生物碱和总酚两个有药理活性的部位。本文通过查阅文献,优化出从桑叶中提取富集得到总酚和总生物碱的最佳工艺参数。这对研制出新型治疗糖尿病药物有着重要的应用价值。所做工作如下:1,通过给小鼠注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型。取桑叶总生物碱、桑叶总酚、桑叶多糖以及大孔柱下液四个部位给药。结果表明桑叶总生物碱降糖作用最为显著P<0.01;桑叶总酚降糖较好P<0.05;大孔柱下液有轻微降糖效果;桑叶多糖则几乎无降糖效果。2,比较上述桑叶四个部位对α-葡萄糖苷酶活力的抑制作用,结果发现其中桑叶总酚和总生物碱部位的抑制作用较强,大孔树脂柱下液效果较弱,同时桑叶多糖几乎无任何作用。3,利用正交实验法筛选出桑叶中总生物碱和总酚的最佳提取工艺,实验结果表明,最佳提取条件为:加水量14倍、提取三次、前两次每次提取1小时第三次提取两小时;验证实验结果总酚提取率94.1%,总生物碱提取率89.6%,说明此工艺重复性好,得率高。2,从8种大孔树脂中筛选出HPD400和HPD826两种树脂混合使用作为桑叶总酚的吸附树脂,同时确定了二者最佳混合比例为1:1(V/V)。通过单因素考察结合正交实验优化出桑叶总酚的最佳纯化工艺,第一次纯化工艺参数为上样量(生药量0.8BV),上样浓度150 mg/mL,上样流速10 min/mL,Na2CO3洗脱体积160mL;第二次纯化工艺为上样量(生药量0.8g),上样流速20min/mL,乙醇浓度70%。验证实验结果为综合评分x+s为(69.9±0.9)%,表明工艺稳定性良好。3,通过单因素考察结合正交实验优化出桑叶总生物碱最佳纯化工艺为,吸附树脂用阳离子交换树脂001×7,上样量(生药量3BV),氨水浓度0.5 mol/L,氨水用量2.5BV。,三次实验结果DNJ含量x±s为(57.8±1.3)%,表明工艺稳定性良好。4,按照实验室小试优选出的最佳工艺流程和参数进行放大生产,中试用量桑叶生药量lOkg,结果中试实验所得总酚干浸膏得率总体在8‰以上,总酚纯度大于50%;总生物碱干浸膏得率总体为1‰以上,总生物碱纯度大都大于50%。结果表明中试所得桑叶总酚和总生物碱纯度较高,工艺稳定性好。
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