目的:观察干腐菌发酵液对氧化应激诱导的衰老细胞中自噬活性的影响,探讨干腐菌发酵液是否具有阻遏细胞衰老的作用及其机制。方法:采用过氧化氢（H₂O₂）诱导NIH3T3成纤维细胞建立应激性衰老细胞模型观察干腐菌发酵液对细胞的抗衰老效应。Western blot和q RT-PCR分别检测蛋白和m RNA表达水平;采用SA-β-gal染色检测细胞衰老程度;DAPI染色检测细胞核内SAHF现象;CCK-8检测细胞增殖能力;免疫荧光检测自噬流变化。结果:1.氧化应激诱导衰老细胞模型建立成功与空白对照组相比,衰老阳性细胞数目显著增加,细胞核内SAHF现象明显,衰老相关基因p16、p21、p53及IL6表达升高。2.干腐菌发酵液抑制氧化应激诱导的细胞衰老与衰老模型组相比,细胞毒性随着干腐菌发酵液处理浓度的增加没有明显的变化,衰老阳性细胞数呈剂量依赖性下降,衰老相关基因p21、p53和IL6表达量明显降低。3.干腐菌发酵液改善H₂O₂诱导的自噬流受损与衰老模型组相比,干腐菌发酵液处理的衰老细胞中p62和LC3蛋白表达明显减少,GFP-LC3荧光淬灭,表明细胞自噬活性增加。4.干腐菌发酵液通过活化AMPK信号通路改善衰老细胞自噬受损与衰老模型组相比,干腐菌发酵液处理后衰老细胞中p62和LC3蛋白表达明显减少,磷酸化AMPK（p-AMPK）水平显著增加,表明细胞活性增加。加入AMPK抑制剂后,自噬相关蛋白p62和LC3蛋白表达与衰老模型组一致,即细胞自噬被抑制,表明干腐菌发酵液的这种抗衰老效应是AMPK依赖性的。结论:干腐菌发酵液可以抑制氧化应激诱导的细胞衰老,且这种抗衰老效应与活化AMPK信号通路和AMPK介导衰老细胞的自噬恢复有关。干腐菌发酵液这种抗氧化应激衰老的效应,扩大了真菌发酵液在衰老机理研究领域的范围,为抗衰老新药研究和开发提供了新的依据和视角。