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为了最大限度的提高多肽类大分子药物重组水蛭素(rHV2)鼻腔给药的生物利用度,本文将rHV2用高分子材料壳聚糖包封制成具有生物粘附作用的纳米粒,并对其鼻腔给药进行了较为系统的研究。首先筛选了rHV2壳聚糖纳米粒的制备方法、处方组成及工艺,并对纳米粒的理化性质、体外释放进行了研究;其次,对纳米粒鼻腔给药的纤毛毒性进行了初步考察,并对纳米粒制成冻干粉进行了研究;最后,对纳米粒经家兔鼻粘膜的渗透性进行了体外评价研究,并对了rHV2壳聚糖纳米粒大鼠鼻腔给药的药动学和药效学进行了初步研究。第一部分文献综述对多肽、蛋白类药物鼻腔给药的研究进展进行了综述;对纳米粒应用于鼻腔给药的研究概况进行了综述;对水蛭素的药学研究进展进行了综述;第二部分实验研究1.重组水蛭素-2(rHV2)壳聚糖纳米粒的制备工艺的研究以包封率为评价指标,采用单因素考察和正交实验相结合的方法对rHV2壳聚糖纳米粒的制备方法、处方组成及工艺进行了较为全面的研究,确定了其最佳制备工艺。经工艺验证实验证明该工艺稳定、可靠,包封率能达到70%以上。2. rHV2壳聚糖纳米粒理化性质的研究通过对纳米粒的粒子形态、粒径分布、表面电荷等一系列理化性质的考察,表明所制备的纳米粒粒径分布较均匀,平均粒径约在200 nm左右。表面带正电荷(>30 mV),提示该纳米粒体系能够较为稳定的存在。3. rHV2壳聚糖纳米粒制剂体外释放研究在体外释放实验中,以离心法考察了rHV2壳聚糖纳米粒的释放情况,实验证实rHV2壳聚糖纳米粒在2 h内突释小于40 %,具有一定的缓释特征。4. rHV2壳聚糖纳米粒鼻腔给药纤毛毒性的初步评价采用蟾蜍在体上腭模型法评价了rHV2纳米粒对纤毛运动的影响。结果表明:rHV2纳米粒对纤毛运动影响较小,为该制剂应用的安全性提供了一定的依据。5. rHV2壳聚糖纳米粒冻干粉的制备选择A、B、C和D为冻干保护剂,通过冻干实验对rHV2壳聚糖纳米粒的冻干工艺进行了优选,确定了最佳处方和工艺。并考察了光照、高温等因素对冻干粉的影响。6. rHV2壳聚糖纳米粒制剂经家兔鼻粘膜的体外渗透试验研究体外渗透试验部分采用水平式扩散池法,以家兔鼻中隔粘膜为渗透屏障,通过测定接受池中透过药物rHV2的量,从而计算出渗透系数。实验结果表明,rHV2壳聚糖纳米粒具有很高的渗透系数,相当于生理盐水组的5倍多。该体外实验提示壳聚糖纳米粒具有很好的经粘膜渗透性,这为后期的体内研究提供的有力的理论基础。7. rHV2壳聚糖纳米粒大鼠鼻腔给药体内药动学研究以皮下注射rHV2生理盐水溶液为对照,得出了rHV2纳米粒鼻腔给药和rHV2生理盐水溶液鼻腔给药的相对生物利用度(Fr),并用3P87软件求算了其药动学参数。实验结果表明rHV2纳米粒鼻腔给药能显著地提高体内生物利用度,与皮下注射生理盐水组相比,相对生物利用度接近30 %。8. rHV2壳聚糖纳米粒大鼠鼻腔给药药效学的初步研究以正常大鼠为动物模型,活化部分凝血活酶时间(APTT)为评价指标,皮下注射rHV2生理盐水溶液为对照,对rHV2壳聚糖纳米粒鼻腔给药的药效学进行了初步评价。结果表明rHV2壳聚糖纳米粒对正常大鼠具有显著的抗凝血效应。第三部分总结和讨论对实验研究中各结果进行总结、分析和讨论。