【摘 要】
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miR-941是我研究小组报道的人类特有的小RNA,可能与人类进化相关,其细胞功能还属未知。通过miR-941过表达稳转细胞系的建立和在细胞水平、分子水平的检测,本论文对miR-941的
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miR-941是我研究小组报道的人类特有的小RNA,可能与人类进化相关,其细胞功能还属未知。通过miR-941过表达稳转细胞系的建立和在细胞水平、分子水平的检测,本论文对miR-941的潜在细胞功能进行了研究。在构建的miR-941过表达的293T稳转细胞中,通过EdU方法与Transwell检测未发现miR-941对293T细胞的增殖和迁移有明显影响,流式细胞术检测发现miR-941能够明显促进293T细胞的坏死;微丝微管免疫荧光染色发现miR-941使293T具有中心体微管富集点的细胞减少,细胞边缘protrusions变细,微丝黏着斑面积与分布发生异常。在Hela稳转细胞中,进一步对miR-941过表达造成的细胞骨架变化进行鉴定,论文发现其过表达对微管分布没有明显影响,而微丝在细胞边缘更为明显。细胞周期检测显示miR-941过表达细胞的S期细胞增多;在促微管解聚药物Vincristine作用下,Hela细胞的增殖降低,但miR-941过表达细胞所受影响显著低于对照;在促微丝聚合药物Jasplakinolide作用下,miR-941过表达细胞微丝变化较小,而促微丝解聚的LatrunculinA使微丝解聚较严重。QRT-PCR对Hela稳转细胞系中PRKAG2等8个细胞骨架相关蛋白基因的表达量检测显示miR-941过表达影响这些基因的表达量,其中PRKAG2、KLHL2分别显著上调和下调,其调控机制有待进一步研究。本论文研究显示miR-941的存在可能促使细胞骨架的动态性,使人类细胞在应对外来的影响时细胞骨架具有更强的调节性和可塑性。
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