黄酒中生物胺代谢合成微生物群落初步探究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maigcy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
生物胺是黄酒中的主要危害物之一,主要由乳酸菌产生的氨基酸脱羧酶作用于相应的氨基酸前体产生,解析黄酒中生物胺的生成机制及其与乳酸菌群落之间的关系对于黄酒的安全酿造至关重要。本文针对工业级别半干型黄酒酿造,深入研究了乳酸菌在黄酒酿造过程中的动态变化规律,明晰了乳酸菌与生物胺之间的关系。针对生物胺产生菌进行高通量筛选,研究不同酿造环境因素对其产胺的影响,为黄酒酿造过程中生物胺的降低提供了理论依据。最后构建含有不产生物胺乳酸菌和产生物胺乳酸菌的合成微生物群落,进一步揭示了黄酒中乳酸菌之间的相互作用关系及其对生物胺生成的影响。主要研究结论如下:(1)建立了一种基于叠氮溴化丙锭预处理结合荧光定量PCR检测乳酸菌活菌数的方法,该方法特异性好,灵敏度高(检测限为4.0×101-1.7×103 CFU?mL-1),重复性好(Cq值变异系数小于1.5%),与平板计数相比差异不显著(统计学上),P>0.05,为解析样品中乳酸菌的实时组成及检测具有活性但不可培养(Viable but nonculturable,VBNC)状态的乳酸菌提供了可靠手段。采用该方法检测黄酒酿造过程中的乳酸菌动态变化规律,结果发现黄酒酿造过程中乳酸菌活菌数呈下降趋势,乳杆菌属(Lactobacillus)和乳球菌属(Lactococcus)是黄酒酿造过程中的优势乳酸菌,分别占乳酸菌总量的69.88%-96.45%和2.75%-28.44%。进一步针对乳杆菌属检测发现,发酵乳杆菌在黄酒酿造全过程都具有较高的含量,约为3.08×104-4.95×105 CFU?mL-1,占乳杆菌总量的25.22%-44.60%。(2)采用脱羧酶培养基对黄酒酿造过程中生物胺产生菌进行了高通量筛选,经16S rRNA基因鉴定共得到31株产生物胺乳酸菌,包括8株乳杆菌属和23株肠球菌属。高效液相色谱测定其生物胺生成能力,发现菌株之间产生物胺水平具有较大差异。腐胺、尸胺、组胺、酪胺和苯乙胺是产量较高的生物胺,其最高产量分别为781.49、990.03、79.85、692.16和284.39 mg?L-1。PCR检测31株菌株的酪氨酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶基因,分别得到23、8和8个阳性结果。探讨不同酿造环境因子对产胺乳酸菌生物胺代谢特性的影响,发现pH 4.0-5.0、酒精度2%-6%、葡萄糖5 g?L-1和温度35℃是乳酸菌积累生物胺的最适条件,氨基酸对生物胺的产生具有有限的促进作用,超过0.1%的氨基酸添加量不再显著增加生物胺的产量。(3)构建含有不产生物胺乳酸菌和产生物胺乳酸菌的合成微生物群落,测定不同组合中乳酸菌活菌数和生物胺含量。结果表明Lactobacillus sp.L1-2、L.fermentum LF-1和Enterococcus sp.E1-9混合培养时,Lactobacillus sp.L1-2抑制了L.fermentum LF-1和Enterococcus sp.E1-9的生长。L.fermentum LF-1和Enterococcus sp.E1-9促进了Lactobacillus sp.L1-2对于腐胺的产生(从3.95增加到4.36-20.06 mg?L-1)。当向组合Lf-Ls-Es中加入L.plantarum后,Lactobacillus sp.L1-2和Enterococcus sp.E1-9的最大生物量分别从1.39和1.49×108 CFU?mL-1下降至8.19和5.22×107 CFU?mL-1,生物胺总量下降了22.15%,为43.54 mg?L-1
其他文献
目的探讨参芪扶正注射液对老年冠心病患者血清CRP、IL-6及IL-10水平的影响。方法选取温岭市第一人民医院中西医结合科诊断为老年冠心病患者64例,按随机数字表法分为对照组和
目的探讨糖尿病母亲新生儿脐血血清促代谢因子(Betatrophin)水平的变化及其临床意义,为早期预防糖尿病、心血管疾病等多种肥胖相关性疾病的发生提供新途径。方法选取妊娠期糖
难降解有机污染物由于具有稳定性高、毒性强的特点而不能用传统的生化方法处理,成为科研工作者研究的重点及难点。相比之下,高级氧化技术(Advanced Oxidation Process,AOP)由于
随着新农村建设战略的深入,农村整体环境风貌得到不断提升,农村道路绿化设计思路也要随之改变,由原来的以遮挡为主的绿色通道模式,提升为结合并体现沿线风貌的生态景观廊道模
<正> “下病上取”,首见于《内经》。《素问·五常政大论》云:“气反者,……病在下,取之上。”《灵枢·终始篇曰:“病在下者高取之。”“下病”者,病证显现于下也;“上取”者
我国是最早建立通信组织的国家之一,邮驿在我国有着悠久的历史。它曾在在政治、经济、军事的信息传递中扮演了重要的角色。但是随着人类生产力的提高和社会的发展,原有的这种
给水排水管网是现代市政工程系统的重要组成部分,应从城市系统的观点出发进行规划设计,为城市建设提供科学依据。其中,给水排水管网优化设计工作又是市政给水排水管网工程的重中
通过基于学习者需求的问卷调查,分析了东北某高校379名硕士研究生的外语能力现状、对外语教学的满意度以及对未来外语教学的期望。结果表明:研究生的英语学习动机整体较弱,具
黄芪是常用大宗中药材,根腐病的普遍发生严重阻碍其产业化发展。抗病育种是当前根腐病防治最经济安全且有效的方法。然而,由于抗病性指标缺失、传统抗性鉴定方法效率低下等原
21世纪是生命科学的世纪,人类基因组计划(human genome project,HGP)的完成不仅使人类向完全认识自身迈出了一大步,而且使生命科学的研究进入了一个新纪元。如今,医学遗传学