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采用大蜡螟幼虫诱捕的方法从土样中诱捕昆虫病原微生物,对得到的昆虫病原微生物进行分离,经过纯培养后,再进行回复感染实验,得到了1株杀虫活性较强的昆虫病原细菌菌株RG-1。对菌株RG-1进行分类鉴定,结果表明,其生理生化性状与Serratia marcescens subsp. Sakuensis(?)勺比较吻合,只有2个性状不同,而与Serratia nematodiphila有9个性状不同,与Serratia marcescens subsp. Marcescens也有8个性状不一样。16SrDNA同源性比对分析表明菌株RG-1与Serratia marcescens subsp. Sakuensis的16SrDNA的同源性最大为99.855%,与Serratia nematodiphila的同源性亦为99.855%,与Serratia marcescens subsp. Marcescens的同源性次之为99.566%。通过构建菌株RG-16S rDNA系统发育树,结合生理生化性状从而确定其为沙雷氏菌(Serratia)。菌株RG-1革兰氏染色反应呈阴性,菌体呈杆状,周身鞭毛；菌落颜色为红色或淡粉红色,圆形且平坦,边缘光滑,并且相互粘连,单菌落较难分开。菌株RG-1能利用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖、木糖、淀粉、甘露糖、纤维二糖、山梨糖、肌醇、卫芳醇、阿拉伯醇、侧盏金花醇、甘露醇、木糖醇、苦杏仁苷、胆汁七叶苷、七叶苷、鸟氨酸、粘液酸、尿素、葡萄糖酸盐、枸橼酸盐、N-乙酰葡萄糖胺、葡萄糖胺,不能利用乳糖、棉子糖、赤藓醇、丙酮酸钠、酒石酸盐、丙二酸盐、丙二酸盐、糊精。菌株RG-1氧化酶反应为阴性,接触酶反应为阳性,蛋白酶反应为阳性。实验测得其生长曲线符合一般细菌的生长规律；其在pH2至pH12的情况下都能生长,其最适生长pH为8.00；盐浓度耐受范围为1%-10%,最适生长盐浓度为1%。测定RG-1发酵液上清对大蜡螟初孵幼虫和老熟幼虫的毒力,当1g人工饲料中添加100μg发酵液冻干粉时,其对初孵幼虫的校正死亡率为33.6%,168h后体重抑制率为52.2%。向老熟幼虫血腔内注射20μL浓度为1.0μg·1μL-1的发酵液冻干粉溶解液,其校正死亡率为93.3%。将昆虫病原细菌菌株RG-1的菌体细胞浓度稀释成如下梯度：107、106、105、104、103、102、101,注射大蜡螟老熟幼虫血腔内,测得其半数致死剂量为187.66个菌体细胞。发酵液上清液中的杀虫物质对蛋白酶K敏感,上清液蛋白酶K水解处理后杀虫活力下降很大,死亡率仅为31.1%；表明发酵液中杀虫活性主要组分为蛋白质。RG-1菌株胞外杀虫蛋白粗提物对大蜡螟初孵幼虫的胃毒毒力很高,当1g人工饲料中添加100μg杀虫蛋白粗提物时,168h后校正死亡率达到45.5%,生长抑制率也达到了75.2%。将杀虫蛋白粗提物溶解,并稀释到浓度为1.6μg·μL-1,用微量注射器将稀释好的杀虫蛋白粗提物10μL注射到大蜡螟的血腔内,24h后大蜡螟校正死亡率为95.2%。表明菌株RG-1胞外杀虫活力比较强。RG-1胞外杀虫蛋白粗提物冻干粉经Sephadex G-75凝胶层析出现2个峰,分别命名为RGS-Ⅰ和RGS-Ⅱ。检测胃毒活力时,都按照1g人工饲料中添加100μ冻干粉的比例分别添加RGS-Ⅰ和RGS-Ⅱ, RGS-Ⅰ校正死亡率为50.7%,168h后体重抑制率为77.3%；RGS-Ⅱ校正死亡率为29%,体重抑制率为25.4%；该结果显示RGS-Ⅰ为胃毒力活性峰。检测血腔毒力时,向每头大蜡螟体内注射10μL浓度为1.6μg·μL-1杀虫蛋白冻干粉溶解液,RGS-Ⅰ的校正死亡率为94.1%,RGS-Ⅱ的校正死亡率为30.6%,表明RGS-Ⅰ为血腔毒力活性峰。将RGS-Ⅰ过DEAE Sepharose FF阴离子交换柱,得到2个峰,分别命名为RGD-Ⅰ和RGD-Ⅱ。检测胃毒活力时,都按照1g人工饲料中添加100μg冻干粉的比例分别添加RGS-Ⅰ和RGS-Ⅱ,RGD-Ⅰ校正死亡率为27.9%,体重抑制率为24.2%,RGD-Ⅱ校正死亡率为55.6%,体重抑制率为78.2%,结果显RGD-Ⅱ为胃毒力活性峰。检测血腔毒力时,向每头大蜡螟体内注射10μL浓度为1.6μg·μL-1杀虫蛋白冻干粉溶解液,RGD-Ⅰ校正死亡率为28.3%,RGD-Ⅱ校正死亡率为91.7%,结果显示为RGD-Ⅱ为血腔毒力活性峰。非还原性SDS-PAGE图谱和还原性SDS-PAGE显示,杀虫蛋白经过分子筛和离子柱分离纯化后,在分子量50kDa附近有一明显蛋白条带,表明该蛋白只有一个亚基。根据非还原性SDS-PAGE图谱计算该杀虫蛋白的相对分子质量约为52kDa,命名为RG1P52。