DBTC联合乙醇诱发小鼠CP模型的建立及柴胡疏肝散对其的影响研究

来源 :陕西中医学院 陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stevenyhiker
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【目的】   观察二丁基二氯化锡(Dibutyltin dichloride,DBTC)联合乙醇诱发小鼠胰腺纤维化的作用,以望建立一种可靠的慢性胰腺炎胰腺纤维化模型;观察柴胡疏肝散对慢性胰腺炎小鼠胰腺纤维化的干预作用,及对相关指标的影响,探讨柴胡疏肝散防治慢性胰腺炎胰腺纤维化的作用及机制。   【方法】   健康雄性昆明小鼠随机分为3组(n=40):空白组(Control,Con组)、慢性胰腺炎(Chronic Pancreatitis,CP)模型组、柴胡疏肝散(Entrapement scattered ShuGan)治疗组。模型组及柴胡疏肝散组经尾静脉一次性注射DBTC(8mg/kg)后以10%乙醇饲喂造模,造模后第三天随机分为模型组和柴胡疏肝散组,柴胡疏肝散组以柴胡疏肝散(0.5g生药/ml,6g/kg/d))进行灌胃治疗。各组在造模后第1天、第1周、第2周、第4周、第8周五个时间点分别麻醉处死动物,取血检测血清淀粉酶(AMS)、脂肪酶(Lipase)的活性变化;取胰腺、肺、肝、脾组织,甲醛固定、石蜡包埋、切片,HE染色及胶原纤维(Masson)染色观察组织病理学改变。   【结果】   1.DBTC联合乙醇诱发小鼠慢性胰腺炎胰腺纤维化模型。   小鼠经尾静脉注射DBTC联合10%乙醇饲喂后,1天血清淀粉酶活性明显升高、1周、2周、4周较造模后1天稍有下降,但与空白组相比,血清淀粉酶活性仍明显升高,差异具有显著性(P<0.01),而8周时血清淀粉酶活性明显降低(P<0.01);造模后1天血清脂肪酶活性升高(P<0.05),而1周、2周、4周、8周血清脂肪酶活性均降低,与空白组比较,差异具有显著性(P<0.01)。造模后1天可见胰腺腺泡细胞肿胀,间质有大量炎细胞浸润及出血,并可见胰腺腺泡多处不同程度的片状坏死;造模后1周、2周即可见胰腺明显肿胀,胰胆管扩张,实质变性,间质水肿,大量炎症细胞浸润,1周后即可见成纤维细胞,胰腺实质纤维化,2周更为明显;4周后小叶间纤维化,胰腺腺泡明显萎缩,出现典型的不规则纤维化,脂肪替代,胰岛游离,结构松散。8周可见多个胰腺小叶内的腺泡组织及胰岛消失,纤维组织广泛增生呈网格状。胶原纤维(Masson)染色显示造模后4周和8周胰腺腺泡明显萎缩,出现典型的不规则纤维化,并可见多个胰腺小叶内的腺泡组织及胰岛消失,纤维组织广泛增生呈网格状。   2.柴胡疏肝散对DBTC联合乙醇诱发的慢性胰腺炎的治疗作用   柴胡疏肝散治疗组血清淀粉酶活性在1周、2周、4周可见明显降低,与模型组比较,差异具有显著性(P<0.01),造模后8周柴胡疏肝散组血清淀粉酶活性下降程度明显低于模型组,差异具有显著性(P<0.01);柴胡疏肝散治疗组造模后1周、2周、4周、8周,血清脂肪酶活性低于正常组(P<0.01),而尤以1周和8周显著(P<0.01)。柴胡疏肝散治疗组在各时间点胰腺的纤维化损伤程度明显减轻。   【结论】   1.DBTC一次性尾静脉注射联合饮用乙醇可以较成功地建立小鼠CP模型,该模型胰腺组织病理表现符合人类CP的病理形态学特征及血清淀粉酶、脂肪酶活性改变。此种建立小鼠慢性胰腺炎模型的方法具有操作简单、建模时间短、CP成模率高及成本较低等优点,是研究CP发病机制及观察药物治疗作用的良好研究模型。   2.柴胡疏肝散可以有效抑制胰腺组织的纤维化,对慢性胰腺炎具有治疗作用。
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