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前言:
CD147,属于免疫球蛋白超家族成员,是一种高度糖基化的单次跨膜糖蛋白,在体内分布广泛。近些年来国内外的研究发现在多种肿瘤中,CD147表达均有增强,同时基质金属蛋白酶(Matrix metal proteinase,MMP)活性增加,使之与肿瘤的浸润和转移相关。目前对于CD147的研究热点是其作为基质金属蛋白酶诱导剂,刺激细胞产生MMPs,在肿瘤细胞的浸润和转移中的作用。治疗学的研究表明,CD147可能成为多种疾病治疗的靶点,其作用值得研究。
蕈样肉芽肿(mycosis fungoid,MF)是一种少见的皮肤T细胞淋巴瘤,早期病变局限于皮肤,随着病情的缓慢发展,晚期可侵犯淋巴结及内脏系统而具有明显的恶性倾向。MF的发病机制及浸润过程目前仍不很清楚。
目的:
国外学者的研究证明CD147在T细胞淋巴瘤患者淋巴结中有表达增强,对其在蕈样肉芽肿患者皮损中的表达国内外尚未有研究报道。本实验应用免疫组化方法对蕈样肉芽肿患者皮损中CD147的表达情况进行了初步研究。
材料与方法:
一、实验材料
选取中国医科大学附属第一医院皮肤科门诊及病房,经临床及病理诊断符合MF和扁平苔藓的患者的冰冻皮损标本。MF18例,其中斑片期及斑块期16例,肿瘤期2例。扁平苔藓15例。正常皮肤对照5例均取自外伤手术患者。
二、免疫组化方法将入选标本冰冻组织块于恒冷切片机中切成5微米厚切片,经过冷无水丙酮固定,然后用3%过氧化氢溶液中孵育15分钟消除内源性过氧化物酶,运用免疫组化S-P法进行染色。主要试剂:CD147抗体(Hab/18G,鼠源性单克隆抗体IgG,2毫克/毫升,1:12800稀释,第四军医大学,陈志南院士惠赠),通用型免疫组化试剂盒(福州迈新生物技术公司生产),AEC显色剂,苏木素复染剂,明胶封片剂。
三、结果判定
细胞经AEC染色呈褐红色为CD147阳性表达。计数真皮内连续3个高倍镜视野下浸润细胞数。表达<10%计为阴性(-)。阳性的标本包括四个等级:10%--25%浸润细胞染色计为(+),25%-50%浸润细胞染色计为(++),50%--75%浸润细胞染色计为(+++),>75%浸润细胞染色计为(++++)。
四、统计方法:
采用SPSS13.0统计分析软件处理数据。使用Mann-Whitney U检验,P<0.05时认为有统计学差异。
结果:
正常皮肤中CD147表达于表皮基底层,自基底层向上表达逐渐减弱。真皮浅层未见明显表达。18例MF皮损处表皮基底层均有CD147的表达,且表达于表皮全层。真皮肿瘤细胞浸润部位有CD147的明显表达。15例扁平苔藓皮损处表皮基底层均有CD147的表达,且基底层向上表达逐渐减弱。真皮浅层淋巴细胞呈条带状浸润未见CD147的明显表达。
Mann-Whitney U检验显示蕈样肉芽肿和扁平苔藓皮损真皮浸润细胞处相比,两者之间的CD147的表达有统计学差异,P<0.05。
结论:
一、正常表皮可见基底层CD147较强表达,基底层向上表达逐渐减弱。
二、MF皮损处角质形成细胞可见CD147的表达,基底层向上表达逐渐减弱不明显。真皮内浸润的肿瘤细胞可见有CD147明显表达。
三、扁平苔藓皮损处角质形成细胞细可见CD147的表达,基底层向上表达逐渐减弱。真皮中浸润的淋巴细胞无CD147的明显表达。
四、MF与扁平苔藓两者之间的CD147的表达有统计学意义,MF患者皮损真皮中CD147的表达较扁平苔藓强。