猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus 1,PSV-1)属于小RNA病毒科,萨佩罗病毒属,是一种无囊膜、球形的单股正链RNA病毒,可引起猪腹泻、肺炎、生殖障碍、非化脓性脑炎和脊髓炎等多系统综合征。本研究以原核表达的PSV-VP1蛋白建立了检测PSV-1抗体的间接ELISA方法,并与建立的间接免疫荧光技术(IFA)进行了比较;运用该方法研究了PSV-1的抗体消长规律。具体内容如下:1.以实验室分离的PSV Hu N1/2016株制备细胞抗原板,一抗和荧光二抗均稀释300倍,建立了检测PSV-1抗体的IFA方法。2.将PSV-1编码VP1基因克隆至p ET-28a(+)载体,构建重组质粒。Western blot试验表明纯化的包涵体形式的重组蛋白具有良好的特异性和反应原性。以VP1建立的间接ELISA方法条件为:抗原包被250 ng/孔、血清稀释100倍、血清在37℃孵育30min、酶标二抗稀释6000倍在37℃孵育30min、底物在37℃作用20min。以S/P值≥0.235为阳性,S/P值≤0.191值为阴性,介于两者之间为可疑。对比建立的ELISA方法和IFA方法,两者总符合率为82.6%。抗原板批内与批间变异系数为1.6~7.0%。3.以该方法对采自湖南省5个规模化猪场400份血清样品进行检测,结果显示,五个场的PSV-1抗体消长规律大致相同:第2-6周龄仔猪抗体较低且呈下降趋势;8-12周龄仔猪抗体呈上升趋势,之后到18周龄抗体平均水平基本稳定;母猪群抗体平均值较低。