小鼠卵母细胞的孤雌激活和胚胎干细胞的初步研究

来源 :南京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LUZIBIN
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本文选择昆明小鼠为研究对象,对其胚胎干细胞的建立进行了初步研究,对卵母细胞的孤雌激活、孤雌胚胎的发育潜能以及贴壁生长进行了研究,为孤雌胚胎干细胞的建立提供一些基础。主要结果如下: 1.建立的5株昆明小鼠类ES细胞,在第6代仍能在饲养层上形成克隆,且碱性磷酸酶检测显阳性,将类ES细胞注射入同品系小鼠的腹股沟能形成瘤,可以分化形成多种细胞。 2.小鼠卵母细胞经乙醇激活后,有四种类型,其中2极体1原核(2PB1PN)和速急卵裂(2-cell)所占比例较大为79%,1极体1原核(1 PB1PN)和1极体2原核(1PB2PN)所占的比例较少10%。 3.孤雌胚胎经体外培养,桑葚胚发育率为43.1%,囊胚发育率为10.9%,囊胚扩张率为5.9%。 4.卵母细胞用10%的乙醇在37℃条件下处理5min可以获得较高的激活率和体外发育率。 5.来源于速急卵裂(2-cell)的孤雌胚胎具有更好的体外发育率。 6.透明带完整的孤雌囊胚的孵化率和贴壁率非常之低,且绝大多数都不能孵化。 7.去透明带的孤雌桑葚胚的扩张率和贴壁率显著地高于透明带完整的孤雌囊胚的扩张率和贴壁率,且前者ICM发生增殖。
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