目的：　　双膦酸盐是目前临床上用于治疗骨源性恶性肿瘤的一线化疗药物。近年来，随着这类药物的广泛使用，有关其并发症的报道，特别是用于化疗时导致下颌骨坏死的病例时有报道。目前双膦酸盐颌骨坏死(bisphosphonate-relatedosteonecrosis of the jaw bone，BRONJ)的发生机制尚不清楚，这已成为制约双膦酸盐药物临床应用的重要问题。血管的损伤与其他部位骨坏死之间的关系一直受到学者们的关注，提出了微血管损伤学说。本实验通过检测临床上常用的且易引起BRONJ的一类双膦酸盐药物唑来膦酸(zoledronate，ZOL)对血管重要构成细胞血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)损伤的影响，从细胞角度探讨双膦酸盐对血管的损伤和引起颌骨坏死的可能机制。　　方法：　　本实验使用ZOL刺激HUVEC建立双膦酸盐对血管细胞损伤影响模型，并检测与血管再生相关的细胞增殖、迁移和黏附功能与血管损害相关的细胞凋亡过程的变化，而反映双膦酸盐对血管的损伤情况。人脐静脉血管内皮细胞按标准细胞培养程序进行培养。ZOL粉剂用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline，PBS)溶解，用前按实验要求调配至所需浓度并过滤除菌。在HUVEC状态良好时进行实验，实验设置实验组（使用不同浓度ZOL药物刺激）和对照组（不使用ZOL刺激）。在倒置显微镜下观察24小时后实验组与对照组细胞形态情况并拍摄照片记录结果，从细胞表面形态变化观察ZOL对HUVEC的影响，使用MTT实验、细胞迁移实验、细胞黏附实验、流式细胞周期实验、流式细胞凋亡实验分别检测ZOL对HUVEC活性、迁移、黏附、增殖和凋亡的影响，western blot实验从蛋白分子水平分别检测ZOL对HUVEC增殖、迁移、黏附和凋亡的影响，比较实验组与对照组实验结果。数据表示为平均值±标准差，实验结果用统计产品与服务解决方案软件(StatisticalProduct and Service Solutions，SPSS，美国)进行统计学分析。使用t检验比较空白对照组与各浓度组之间差异是否有统计学意义，以双侧P＜O.05为差异有统计学意义。　　结果：　　①显微镜下观察可见在ZOL作用下细胞形态发生改变，细胞皱缩、形态多样、边缘粗糙、呈细枝状伸出、随着浓度的升高变化更为显著，死亡细胞明显增多。　　②MTT实验中，与空白对照组相比，实验组吸光度值（A值）明显减小。且随着药物浓度升高，A值依次减小。IC50值为629.8×10-7 mol/L。说明ZOL抑制HUVEC细胞活性，且在一定浓度范围内呈量效关系。　　③细胞迁移实验中，与空白对照组相比，实验组细胞迁移距离降低，且随着用药浓度的升高，细胞的迁移距离依次下降。表明ZOL抑制HUVEC的迁移，且在一定浓度范围内呈量效关系。　　④细胞黏附实验中，与空白对照组相比，低、中、高浓度组吸光度降低，且随着药物浓度升高，细胞A值依次减小。表明ZOL抑制HUVEC的黏附随药物作用浓度升高，抑制作用也更为明显。　　⑤流式细胞周期实验结果显示，与空白对照组相比，实验组细胞细胞周期出现紊乱，S期细胞增多，而G2/M期细胞数减少，且在一定浓度范围内呈量效关系。表明ZOL抑制细胞增殖。　　⑥流式细胞凋亡实验结果显示，与空白对照组相比，实验组细胞早期凋亡数目明显升高，并且随着药物浓度升高，细胞凋亡数目依次升高。表明ZOL促使细胞凋亡，且在一定浓度范围内呈量效关系。　　⑦western blot实验中，与空白对照组相比，实验组细胞内与HUVEC增殖相关的蛋白P-ERK，与HUVEC黏附相关的蛋白VCAM-1，与HUVEC凋亡相关的蛋白P-AKT和Procaspase3显著减少，表明ZOL抑制细胞增殖、黏附，促使细胞凋亡。而与HUVEC迁移相关的蛋白P-p38无显著变化。　　结论：　　①成功建立ZOL损伤血管细胞模型。　　②ZOL抑制HUVEC细胞增殖、迁移和黏附，说明ZOL抑制血管的再生。　　③ZOL促使HUVEC凋亡，说明ZOL可对血管产生直接损伤。　　④双膦酸盐对血管的损伤是双膦酸盐引起颌骨坏死的可能机制。