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化学发光免疫分析是将灵敏的化学发光或生物发光体系与特异的抗原抗体免疫测定结合于一体的检测技术,由于反应体系中酶的催化作用,间接地放大了免疫反应的结果,从而使测定方法达到很高的敏感度。当前,基于微载体的化学发光免疫分析由于其对化学发光信号的放大作用而受到广泛关注,但是传统的膜载体和微球载体在检测过程中不能对生物分子进行编码,这就限制了化学发光检测在多元生物分析中的应用,因此,我们提出了以三维光子晶体微球作为编码载体对蛋白进行多元化学发光分析的设想。 光子晶体是由两种或两种以上具有不同介电常数的粒子在纳(微)米尺度上周期排列所形成,利用光子晶体特征反射峰作为编码元素具有很高的稳定性,近年来,光子晶体材料作为编码载体应用于多元生物分析领域已成为研究者关注的热点。相对于荧光染料编码和量子点编码方法而言,三维结构的光子晶体微球比表面积高,可以固定较多的生物分子,从而显示了更高的灵敏性。因此,依据酶联免疫测定原理,利用光子晶体微球作为编码载体,结合化学发光免疫对蛋白质进行检测是本文的一大亮点。
从论文正文部分开始,首章论述了微乳液滴制备系统的搭建以及微乳液滴直径的影响因素,第二章分别探讨了SiO2与P(MMA-co-BA)光子晶体微球的制备与表征,第三章研究了SiO2和P(MMA-co-BA)光子晶体微球在化学发光检测中的应用。具体的工作如下:
(一)基于微流控技术,设计和搭建了一套单分散微乳液滴的制备系统。对微乳液制备系统的控制软件、外电路、外形进行重新设计,并对微乳液粒径的影响因素进行研究。
(二)利用微乳液制备系统制备了SiO2与P(MMA-BA)的微乳液滴,通过对不同的微乳液滴进行处理得到几种具有不同特征反射峰的光子晶体微球,并对其进行表征。
(三)将制备的两种光子晶体微球作为编码载体,依据酶联免疫测定原理,结合化学发光的方法对IgG进行检测。实验结果表明采用光子晶体微球作为编码载体进行蛋白检测可以实现较高的灵敏度。