【摘 要】
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肌肉生长抑制素（Myostatin,MSTN）是TGF-β超家族成员,发挥负调控肌肉生长的作用,主要在动物骨骼肌中表达。Myostatin前肽（MSTN pro）可以与其结合,抑制其发挥功能,从而达到促进肌肉生长的功能。为了探讨猪肌抑素前肽真核表达载体联合鼠李糖乳杆菌对小鼠肌肉发育和免疫性能的影响,本研究将64只4周龄雄性昆明小鼠,置于室温为20-25℃,相对湿度为50%-70%的标准动物饲养室,
【基金项目】
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山西省重点研发计划项目（201803D221022-4）； 山西农业大学横向科技项目（2015HX12）； 山西农业大学中青年拔尖创新人才支持计划（BJRC201204）； 国家自然科学基金（31872438）； 山西省回国留学人员科研资助项目（2016-067）
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肌肉生长抑制素（Myostatin,MSTN）是TGF-β超家族成员,发挥负调控肌肉生长的作用,主要在动物骨骼肌中表达。Myostatin前肽（MSTN pro）可以与其结合,抑制其发挥功能,从而达到促进肌肉生长的功能。为了探讨猪肌抑素前肽真核表达载体联合鼠李糖乳杆菌对小鼠肌肉发育和免疫性能的影响,本研究将64只4周龄雄性昆明小鼠,置于室温为20-25℃,相对湿度为50%-70%的标准动物饲养室,饲喂基础饲粮和自由饮水,适应一周后随机分成A、B、C、D 4组:生理盐水+空载体（NS+pc DNA3.1（+））组、空载体+乳酸菌（pc DNA3.1（+）+LGG）组、生理盐水+猪肌抑素前肽（NS+pc DNA3.1（+）-MSTN pro）组、猪肌抑素前肽+乳酸菌（pc DNA3.1（+）-MSTN pro+LGG）组,每组16只。第1、16天对各组小鼠左右后腿股四头肌各分两点注射30μL 25%蔗糖溶液,半小时后于小鼠左右后腿股四头肌各注射载体60μL,并且每天早上9点灌胃2 m L生理盐水或者鼠李糖乳杆菌。于15 d和30 d每组随机选取8只小鼠采样。检测其体重、脏器指数、血清免疫相关因子含量和肌肉发育相关因子m RNA表达并观察肌纤维显微结构。结果表明:1、物理指标结果显示,与对照组相比,猪肌抑素前肽组体重有升高趋势,乳酸菌组小鼠胸腺质量、胸腺指数、脾脏质量和脾脏指数显著升高（P＜0.05）。2、ELISA试验检测结果显示,与对照组相比,乳酸菌组血清IFN-λ、Ig G和IL-2免疫因子含量水平显著升高（P＜0.05）。3、HE染色结果显示,与对照组相比,猪肌抑素前肽组小鼠肌纤维横截面积极显著增加（P＜0.01）。4、q RT-PCR检测Myo D、Myo G、Myf5、Pax3、Pax7、Myomaker、Smad3、MSTN转录水平的变化,结果显示,猪肌抑素前肽组Myo D和Myf5 m RNA表达水平显著升高（P＜0.05）,MSTN m RNA表达水平显著降低（P＜0.05）,其余各组各基因差异均不显著。5、猪肌抑素前肽联合乳酸菌组其胸腺指数、脾脏指数、血清IFN-λ、Ig G、IL-2免疫因子含量水平显著升高（P＜0.05）,肌纤维横截面积极显著增加（P＜0.01）,Myo D和Myf5m RNA表达水平显著升高（P＜0.05）,MSTN m RNA表达水平显著降低（P＜0.05）。总之,猪肌抑素前肽联合乳酸菌,可以促进肌肉发育同时还能提高机体免疫性能。本研究为进一步开发既能促生长又能增免疫的基因工程乳酸菌,提供了重要的理论依据。
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