猪圆环病毒2的免疫原性研究

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本研究利用我们从浙江“猪高热综合征”病例分离的PCV2毒株进行了致病力测定。结果显示感染猪的生长明显迟缓。所有猪均能从组织中分离到接种的病毒。不同剂量的病毒接种35日龄仔猪后,在感染后10~14天出现了明显的持续性体温升高。组织和血清中的病毒载量显示,所有组织均可检测到PCV2特异性核酸,其中以腹股沟淋巴结含毒量最高;感染后3-35天均可从感染猪血清中检测PCV2特异性核酸,感染后14天达到高峰。排毒试验结果显示,所有感染猪均能从鼻肛拭子中检测到PCV2特异性核酸。严重的病理性损伤主要发生在肺脏、脾脏、腹股沟淋巴结和肺门淋巴结。不同剂量的病毒接种后,所有被检测的指标以5×10-7TCID50/ml剂量接种猪最显著。在PCV2致病力模型建立后,选用ZJ-U毒株为疫苗株,我们进行了免疫原性研究。结果显示,当病毒用不同浓度的灭活剂X进行灭活时,1:2000稀释的灭活剂X能在48h内完全灭活病毒。选用两种不同的佐剂1和佐剂2制作不相同的两种疫苗进行免疫试验,免疫后14天,佐剂1和佐剂2组均有37.5%的猪ELISA抗体阳转。病毒血症检测显示,免疫组攻毒后14天未能在血清中检测到PCV2核酸,而攻毒对照组能检测到高拷贝的PCV2核酸。组织病毒载量检测显示,免疫组攻毒后14天仅在个别猪检测到低滴度的PCV2核酸,而对照攻毒组的所有猪均能检测到较高滴度的PCV2核酸。病毒再分离显示,免疫后攻毒组部分猪的腹股沟淋巴结在盲传3代后能检测到病毒,但对照攻毒猪在细胞培养第1代即能分离到病毒。病理组织学分析显示,与健康攻毒组比较,免疫攻毒猪未出现明显的病理学损伤。排毒试验检测显示,免疫攻毒组偶有排毒现象,而对照组则是持续排毒。这些数据说明,制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性。与佐剂1相比,佐剂2制备的疫苗效果更优。
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