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目的：检测大肠癌患者肿瘤组织细胞HLA-Ⅰ类分子及相应患者外周血CK20mRNA的含量，研究其与大肠癌临床病理之间的关系，探讨HLA-Ⅰ类分子在大肠癌发生与转移中的作用。
方法：81例大肠癌患者术中取癌组织及癌旁粘膜组织，采用免疫组化S-P染色检测HLA-Ⅰ类分子；相应大肠癌患者于术前及正常对照组均取外周血收集单个核细胞，应用荧光定量-PCR检测CK20mRNA含量，以CN表示，1CN=1拷贝/毫升，设10<4>CN为阈值，≥10<4>CN为CK20mRNA阳性表达。实验数据应用SPSS13.0统计软件进行分析。
结果：
一、大肠癌患者癌组织HLA-Ⅰ类分子表达
1、81例大肠癌患者癌旁组织HLA-Ⅰ类分子均为阳性，而癌组织中HLA-Ⅰ类分子仅有35例阳性，阳性率为43.2％(35/81)，二者比较差异有统计学意义(p<0.001)。
2、依据大肠癌Dukes分期，癌组织细胞HLA-Ⅰ类分子阳性率依次为：A期73.3％、B期55.6％、C期25.9％、D期16.7％，组间比较，差异有统计学意义，P<0.01；各期两两比较： A期与C期、 A期与D期、B期与C期、B期与D期之间差异均有统计学意义，P<0.01。
3、大肠癌转移组患者癌组织HLA-Ⅰ类分子阳性率为23.1％(9/39)，未转移组为61.9％(26/42)，转移组显著低于未转移组，差异有统计学意义(P<0.01)；HLA-Ⅰ类分子表达阳性率随大肠癌转移淋巴结个数增多而降低(P<0.01)。
4、大肠癌肿瘤细胞高分化组13例患者中HLA-Ⅰ类分子阳性率76.9％；中分化组51例大肠癌患者中阳性率41.2％；低分化组17例大肠癌患者中阳性率23.5％。大肠癌患者癌组织HLA-Ⅰ类分子阳性率随大肠癌组织细胞分化程度的降低呈下降趋势(P=0.005)。
5、依据大肠癌浸润程度分组，癌组织HLA-Ⅰ类分子阳性率分别为：已浸透浆膜组29.4％，未浸透浆膜组53.2％，组间比较，P=0.034；浸润达肌层组与浸润达浆膜组HLA-Ⅰ类分子阳性率比较，P=0.017；浸润达肌层组与浸透浆膜组HLA-Ⅰ类分子阳性率比较，P=0.002，差异均有统计学意义。
二、大肠癌患者外周血CK20mRNA表达
1、 30例正常对照组外周血均不表达CK20mRNA，81例大肠癌患者中有30例外周血CK20mRNA表达量>10<4>CN，表达率为37.0％，经统计学处理两组具有显著性差异，P<0.01。
2、 81例大肠癌患者DukesA、B、C、D期外周血中CK20mRNA的表达率依次为13.3％，22.2％，44.4％，83.3％，随分期进展表达率显著上升，其差异具有统计学意义，P<0.01。定量分析结果显示，大肠癌患者外周血CK20mRNA拷贝数与肿瘤分期呈正相关，r=0.500，P<0.001。大肠癌Dukes分期越晚，CK20mRNA的拷贝数越高。
3、转移组大肠癌患者外周血CK20mRNA表达率56.4％(22/39)，未转移组表达率19.0％(8/42)，两组间具有显著性统计学差异，P=0.003。转移组外周血CK20mRNA拷贝数明显高于未转移组，两组间差异具有显著统计学意义，P<0.001，外周血CK20mRNA拷贝数与肿瘤转移正相关，r=0.433，P<0.01。
大肠癌转移至肝或肺的患者外周血检测到CK20mRNA表达率达88.9％(8/9)；转移至局部组织器官患者的表达率为40.9％(9/22)；未发现转移患者的表达率仅为26.0％(13/50)，各组间两两比较，差异均有统计学意义，P<0.05。大肠癌患者外周血CK20mRNA拷贝数与肝/月市转移正相关，r=0.449，P<0.01。
4、大肠癌患者外周血CK20mRNA表达量与肿瘤转移淋巴结数目正相关，r=0.417，P<0.01；转移淋巴结个数多者外周血CK20表达量上升，差异具有统计学意义，P<0.001。
5、随着肿瘤浸润程度的加深，大肠癌浸润达肌层组、浸润达浆膜组、浸润透浆膜组外周血CK20mRNA表达量呈上升趋势，组间具有统计学差异，P=0.006，外周血CK20mR/NA量与肿瘤浸润程度正相关，r=0.518，P<0.01。大肠癌患者外周血CK20mRNA量在肿瘤直径不超过5cm组和超过5cm组之间比较，差异无统计学意义，P=0.135。
三、大肠癌患者癌组织HLA-Ⅰ类分子与外周血CK20mRNA表达的关系
1、81例大肠癌患者，外周血CK20mRNA表达的30例中22例癌组织HLA-Ⅰ类分子表达缺失，缺失率73.3％，51例外周血CK20mRNA不表达者中24例癌组织HLA-Ⅰ类分子表达缺失，缺失率47.1％，二者差异具有统计学意义，P=0.018。
2、大肠癌癌组织HLA-Ⅰ类分子阴性患者的外周血CK20表达量显著高于HLA-Ⅰ类分子阳性者，两组比较有统计学差异，P=0.002；大肠癌癌组织HLA-Ⅰ类分子与外周血CK20mRNA量负相关，r=0.555，P=0.002。
结论
1、大肠癌患者肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子的表达存在缺失，且与大肠癌Dukes分期密切相关，HLA-Ⅰ类分子缺失在大肠癌发生发展中起重要作用。
2、大肠癌患者肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子缺失率随细胞分化程度的降低、肿瘤浸润程度的加深和肿瘤转移而升高，HLA-Ⅰ类分子缺失与大肠癌细胞分化和侵袭转移密切相关。
3、大肠癌患者外周血CK20mRNA表达率随Dukes分期及转移均上升，其含量与大肠癌Dukes分期、浸润、转移均呈正相关，外周血CK20mRNA与大肠癌进展和转移密切相关，可作为检测大肠癌微转移的标志物。
4、大肠癌患者癌细胞HLA-Ⅰ类分子与外周血CK20mRNA含量密切相关，HLA-Ⅰ类分子表达缺失者CK20mRNA含量升高，其联合检测可为大肠癌诊断提供依据。