动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是心血管系统疾病中最常见的疾病,也是血管疾病引起死亡的最主要原因。以AS为病理基础的心脑和外周血管疾病的发病率和病死率逐年增高。经皮血管腔内扩张成形术（Percutaneous transluminalangioplasty,PTA）及支架植入等介入治疗是近年来迅速发展起来的治疗动脉硬化闭塞症的主要方法,因其具有对患者创伤小,并发症少,收效快,操作较简便等优点,目前已逐步取代手术治疗。但术后易发生血管再狭窄（Restenosis,RS）,是目前影响介入治疗远期效果的最主要因素。新生内膜增生是支架再狭窄过程中一个突出的病理现象。血管平滑肌细胞VSMC的过度增殖和迁移是导致RS最为主要的原因,是内膜增生性疾病和动脉粥样硬化发生发展的重要病理机制。而VSMC由收缩表型向合成表型转换是血管损伤后VSMC过度増殖、迁移的始动环节。因而抑制VSMC表型转化是抑制血管病变及防治心血管疾病的根本措施之一。L-茶氨酸对人体各种营养代谢疾病具有防治作用,尤其在降低心血管疾病的风险方面具有突出功效。有研究表明,茶氨酸对血管紧张素Ⅱ引起的血管平滑肌的增殖和迁移有抑制作用,但是对茶氨酸在整体水平对平滑肌细胞的增殖迁移以及对血管平滑肌表型转换的影响还未见报道。本研究证明L-茶氨酸对大鼠颈动脉损伤后内膜形成具有显著的抑制作用,具体的研究结果如下:我们首先成功建立了大鼠颈动脉球囊损伤模型。组织切片HE染色结果表明,与假手术组（sham）相比,内膜剥脱9 d后,可见内膜层轻微增厚,VSMC向内膜迁移、增殖,细胞排列紊乱。术后21 d血管内膜进一步增厚,管腔呈现狭窄。而L-茶氨酸给药组可以明显减轻上述现象,内膜增厚减少,新生内膜面积与中膜面积之比与模型组相比显著减少。免疫组织化学的结果表明,茶氨酸可以显著降低VSMC表型转化增殖标志性蛋白OPN的水平,增加收缩型标志性蛋白α-SMA、SM22α的水平。基于大鼠颈总动脉球囊损伤模型的在体实验结果表明,L-茶氨酸能显著抑制血管内膜的增生,并提示我们L-茶氨酸有可能是通过调节VSMC的表型转化来抑制新生内膜的。我们进一步在离体细胞水平研究了 L-茶氨酸对血管平滑肌细胞的影响。MTT 比色法和EdU细胞增殖检测结果显示,L-茶氨酸对正常生长的VSMC细胞活力和增殖水平没有影响,但是L-茶氨酸能显著降低PDGF-BB和AngⅡ刺激引起的VSMC异常增殖。流式细胞术检测细胞周期,AngⅡ和PDGF-BB刺激24h后,加速了 VSMC细胞周期的进程,使得VSMC从G0/G1期进入S期,而L-茶氨酸可阻断VSMC的细胞进程。细胞划痕测定L-茶氨酸对VSMC迁移的影响,经过PDGF-BB和AngⅡ刺激的血管平滑肌细胞迁移作用明显,可以看出许多细胞跨越划痕的边界,向划痕中心迁移。而预孵L-茶氨酸1h能够在一定程度上抑制PDGF-BB和AngⅡ引发的迁移作用。同时蛋白免疫印迹实验结果表明,PDGF-BB和AngⅡ刺激引起VSMC从收缩表型转化成合成表型。而L-茶氨酸能显著抑制Ang Ⅱ和PDGF-BB对表型标志蛋白OPN、SMA和SM22α的调控。为进一步分析L-茶氨酸调节VSMC表型转化的相关分子机制,我们检测了 L-茶氨酸对VSMC表型转化相关的信号通路的影响。蛋白免疫印迹的检测结果显示,PDGF-BB和AngⅡ刺激下,ERK1/2和STAT3磷酸化水平升高。而L-茶氨酸处理可以显著抑制PDGF-BB和AngⅡ诱导的ERK1/2活化,但对STAT3无明显抑制作用。同时我们发现,PDGF-BB或AngⅡ刺激显著激活ERK1/2上游信号分子Ras-Raf-MEK1/2通路的活化,以及下游转录因子Elk-1的激活,而L-茶氨酸预处理则抑制其激活。而持续磷酸化ERK1/2一定程度上阻断了 L-茶氨酸对VSMC表型转化、增殖和迁移的抑制作用,这些结果表明,L-茶氨酸可通过抑制Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路的活化而影响VSMC的表型调控。综上所述,本研究证明L-茶氨酸能减少血管损伤后新生内膜的形成,并抑制了 VSMC细胞的表型转换的相关蛋白。对L-茶氨酸作用的分子机制进行进一步研究,L-茶氨酸抑制PDGF-BB和AngⅡ诱导的Ras-Raf-MEK1/2-ERK 1/2信号通路的激活,维持VSMC收缩表型,抑制其增殖和迁移。这让我们更加有理由相信L-茶氨酸可作为预防血管成形术后再狭窄和动脉粥样硬化的候选药物。