论文部分内容阅读
中药材的农药污染引发世界各国关注,不仅严重影响了中药材的安全性,而且成为中药进军国外市场的一大障碍,农药进入人体后达到中毒剂量,就会对患者身体造成严重的危害。近几年,为了保证中药材的安全,各国纷纷将更多的农药及农药代谢物纳入检测范围。随着国外技术壁垒的提高,欧盟、日本等国家加大了对中药材进口农药残留检测要求,尤其是日本肯定列表制度的实施,对我国中药材出口产品检测要求更高,检测限更低,这大大制约了我国中药材的出口。为了保证中药材产品的安全,建立中药材中农药多残留分析技术具有十分重要的意义。本文将研究和建立一种中药材中农药及有毒代谢物多残留的快速检测方法。本论文研究共分为两部分,第一部分是采用UPLC-ESI-MS/MS建立中药材中92种农药及农药代谢物多残留的快速检测方法。92种农药包括28种有机磷类、15种氨基甲酸酯类、12种三唑类农药、21种三嗪类农药、取代脲类农药5种及其他类农药11种,其中农药有毒代谢物共14种。采用QuEChERS前处理技术：样品用1%醋酸乙腈超声提取20min后,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)净化处理,以Shim-pack XR-ODS Ⅱ (2.0mm×75mm)为色谱柱,流速为200μ/min,0.05%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,洗脱程序为0～3.0min,65%A～40%A;3.0min,保持40%A;5.0～8.0min,40%A～1%A;8.0～13.0min,保持1%A；13.0-13.05min,1%A～65%A;13.05～15min,65%A。在正离子电喷雾(+ESJ)、多重反应监测模式(MRM)下进行测定。92种农药及代谢物的定量限(S/N≥10)为0.0990～7.54μg/kg;检出限(S/N≥3)为0.0200～2.74μg/kg;在各自的考察浓度内线性良好,r≥0.999；低水平回收率为70.3～134%,RSD为0.70～28%；中水平回收率为70.3～138%,RSD为1.2～24%；高水平回收率为70.1～139%,RSD为0.50～7.0%。该方法操作简单、快速、灵敏,仅在15min内就可以检测92种农药,提高了工作效率,有利于对中药材中农药及有毒代谢物多残留进行快速筛查。论文第二部分是采用GC-ECD建立了中药材中19种含卤素的农药多残留检测方法,本实验选用改进的QuEChERS法。试验中通过考察提取溶剂的种类、超声提取时间、固相萃取柱、洗脱溶剂的种类和体积等影响提取回收率的因素,最终确定的前处理方法为：样品以1%的醋酸乙腈溶液为提取溶剂,超声20min后,采用Florisil固相萃取柱净化,以正己烷：丙酮(9：1)4mL作为洗脱剂,GC-ECD进行检测。优化后的气相色谱条件为：Rtx-5毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm,岛津公司)；升温条件：初始温度为60℃,以15℃/min升至150℃,再以5℃/min升至200℃,保持2min,以3℃/min升至250℃,以10℃/min升至300℃,保持6min；进样口温度：280℃；检测器温度：300℃；柱流量：1mL/min；分流比：10：1；进样量:1μL；载气：高纯氮。19种农药的定量限(S/N≥10)为0.0200～1.04mg/kg；检出限(S/N≥3)为0.00400～0.208mg/kg；在各自的考察浓度内线性良好,r≥0.99；低水平回收率为67.4～124%,RSD%为5.9～21%；中水平回收率为69.9～130%,RSD小于20%；高水平回收率为70.0～128%,RSD小于20%。方法学考察结果表明该方法准确,简单,快速,能够应用与中药材农药多残留的快速测定。将上述两个方法分别成功应用于甘草,西洋参,丹参,三七和人参5种共43个常见中药材样品中农药残留的检测。从检出药材看,43个药材均检出农药残留,且每个药材都存在农药多残留现象；从检出的农药种类看,111种农药中共检出49种农药,检出率为43.8%,残留量均低于0.5mg/kg。本文建立了中药材中112种农药及农药代谢物残留的检测方法,快速简便,可以实现大量药材农药多残留的快速检测。