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球虫和隐孢子虫是对奶牛养殖业具有严重危害的主要致病性原虫,可以对不同年龄段的奶牛群造成危害,尤其对于犊牛的危害最大;其引起的急性或慢性肠道炎以及其他疾病给奶牛养殖业造成了巨大的经济损失。河北省是我国奶业的主要大省,目前存栏奶牛为180.79万头,基本实现了养殖规模化,但是由于盲目扩张奶牛养殖规模导致许多病原的广泛传播,特别是奶牛球虫和隐孢子虫。 本试验通过对河北省部分地区球虫和隐孢子虫感染状况的调查以及虫种的鉴定,以期为今后该地区球虫和隐孢子虫病的防控研究奠定基础。本论文在不同季节分别从邢台、衡水、石家庄、沧州、保定、唐山和张家口7个地市的奶牛场随机采取1020份粪样作为试验样本。 试验内容及结果如下:粪便样品经饱和盐水漂浮后直接镜检,犊牛、青年牛、成年牛的球虫感染率依次为15.5%、8.5%和5.1%,球虫平均感染率为10.5%,可推断球虫感染情况随着年龄增长日益减轻。不同季节中,冬季、春季、夏季和秋季的球虫感染率分别为7.4%、7.6%、16.5%和10.5%;其中以夏季的球虫感染率最高。从季节上来看,奶牛感染球虫多发生于炎热潮湿的夏季。邢台、衡水、石家庄、沧州、保定、唐山和张家口的球虫感染率分别为10.5%、6.7%、13.0%、10.4%、15.2%、8.3%和9.6%。其中,保定和石家庄地区的球虫感染率最高,衡水地区的球虫感染率最低。根据卵囊形态、结构和测量的大小,鉴定出球虫种类有6种,分别为:牛艾美耳球虫(E.bovis)、奥博艾美耳球虫(E.auburnensis)、亚球艾美耳球虫(E.subspherica)、椭圆艾美耳球虫(E.ellipsoidalli)、柱状艾美耳球虫(E.cylindrce)和邱氏艾美耳球虫(E.zuernii);其中,牛艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫和邱氏艾美耳球虫的检出率最高。 粪便样品经饱和蔗糖溶液漂浮后直接镜检和抗酸染色后镜检,结果发现隐孢子虫的平均感染率为5.8%。犊牛、青年牛、成年牛的隐孢子虫感染率分别为8.6%、5.3%和1.3%。邢台、衡水、石家庄、沧州、保定、唐山和张家口的隐孢子虫感染率分别为2.0%、4.8%、10.6%、5.7%、8.1%、2.6%和3.7%;其中,感染率最高的地区为石家庄,感染率最低的地区为邢台。 采用聚合酶链式扩增反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)对镜检阳性样品进行18SrRNA基因的扩增,有58份样品扩增出片段长度为830bp左右的18SrRNA基因;通过利用限制性片段长度多态性分析(Restriction Fragements Length Polymorphism,RFLP)和同源性分析证实,3个虫株分别与日本的安氏隐孢子虫(C.andersoni)、重庆等地区的牛隐孢子虫(C.bovis)和河南省的微小隐孢子(C.parvum)的亲缘关系最近。