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耐药菌在水体环境中的广泛分布与传播对人类健康产生了巨大威胁,污水处理厂汇集多种来源的污水,其中含有大量的耐药菌。尽管二级处理能够去除污水中的大多数细菌,但处理出水中的耐药菌数量依然可观,二级处理出水排放是否会对受纳水体中细菌的耐药性和群落结构产生影响备受关注。氯消毒是最常见的污水消毒工艺之一,在有效杀灭微生物的同时是否会导致耐药菌比例的增长是近年来研究的热点问题。本研究通过分子生物学检测和耐药表型分析,考察了西安市浐河、灞河和邻近的污水处理厂排放出水中细菌的耐药状况,研究了携带抗生素抗性基因的接合子在氯消毒过程中的特性,从而为优化污水消毒工艺、控制城市水环境中耐药菌的传播提供科学依据。采集西安市浐河、灞河和城市污水处理厂排放出水水样,利用细菌培养技术、PCR检测和变性梯度凝胶电泳分析技术,对异养菌的耐药率、四环素抗性基因以及微生物群落结构进行了研究。结果表明:浐河和灞河各点水样中异养菌对磺胺甲恶唑、四环素、环丙沙星和头孢噻肟的平均耐药率分别为18.3%、6.2%、2.7%和1.3%,耐药率高低顺序与污水厂排放水中的异养菌相同。城市河流中异养菌浓度与其耐药率并不存在显著的相关性,与上游河段相比,污水厂排放口的下游河段的异养菌含量没有明显增加,但对多种抗生素的耐药率却有所升高。浐河和灞河中四环素抗性基因主要是tetA和tetB,检出率分别为100%和75%,这意味着城市河流中异养菌对四环素的耐药性可能主要通过编码外输泵蛋白的抗性机制来实现。污水厂排放水进入城市河流,会使某些原有的敏感物种消失,而病原菌或条件致病菌在邻近排放口的下游河段则有所增加。以从污水处理厂筛选出的多重耐药沙门氏菌为供体菌,大肠埃希氏菌NK5449为受体菌进行接合实验,使用K-B药敏纸片法对接合子进行耐药表型分析,运用碱裂解法提取接合子携带的可接合性质粒。结果表明:36株多重耐药沙门氏菌中,有15株沙门氏菌接合成功,接合率为41.7%,部分多重耐药沙门氏菌具备向不同菌属的细菌水平转移可移动遗传元件的能力。新获得的15株接合子均携带有质粒,其中有14株接合子耐药表型均为TET-SMZ-AMP-CHL-STP-GEN,接合子的耐药表型和其对应的供体菌具有相似性。通过模拟实验,比较研究氯消毒工艺对接合子conA4和受体菌NK5449灭活和复活的影响。结果表明,氯消毒对conA4和NK5449的灭活率无显著性差异。在有效氯浓度1mg/L、接触时间8min时,conA4和NK5449的灭活率分别为5.3-log和5.2-log。在同样CT值(8mg·min/L)条件下,高浓度氯剂量、短接触时间对conA4和NK5449的灭活率高于低浓度氯剂量和长接触时间的。经氯消毒后接合子conA4对四环素、磺胺甲恶唑、氯霉素由耐药转变成敏感,而对庆大霉素由敏感转变为耐药。在氯消毒结束后的接合子复活过程中,经8mg·min/L氯消毒接合子复活48h后,接合子对6种抗生素的耐药表型没有发生改变。16mg·min/L氯消毒后接合子在复活过程中6种抗生素产生的抑菌环直径和8mg·min/L氯消毒后复活的结果相比较,没有显著性差异。