Notch信号传导通路是近年来的肿瘤研究热点之一，相邻细胞间通过Notch受体传递信号可以调节包括干细胞在内的多种细胞的分化、增殖和凋亡，影响组织和器官的形成和发育。Notch信号传导通路中某些分子的基因突变与多种恶性肿瘤的发生发展有关。文献报道Notch在多数肿瘤中起癌基因作用，但也有少数肿瘤中起抑癌基因作用，即使在同一肿瘤的不同阶段Notch受体所起的作用是不一样甚至相反的。Notch配体Jagged在各肿瘤中的作用也不是完全清楚，研究发现也存在双重作用。因此分清Notch在特定肿瘤中的作用是有必要的。从Kunnimalaiyaan的文献报道的列表中可以清楚的看到，像胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌等等中Notch1为致癌基因，而像甲状腺髓样癌、小细胞肺癌等等为抑癌基因。 在哺乳类动物中已发现有4个同源Notch受体，分别为Notch1～4；5个同源配体，为Delta样配体，分别是D111、D113、D114，和Serrate样配体，分别是Jagged1、Jagged2。Jagged1配体可与Notch1配体结合。Notch1和Jagged1在肿瘤中表达水平与肿瘤的侵袭性、复发与转移、临床预后等相关的研究较多。如Callahan通过检测乳腺肿瘤中Jagged1的mRNA和蛋白水平后认为表达水平的升高可预测肿瘤发生过程中Notch信号的增加。Thurston发现在无淋巴结转移的乳腺癌中，Jaggel表达增加导致肿瘤相关微环境中的Notch信号增强，从而激活肿瘤细胞，认为对于促进癌症发展Jagge1表达增加起着重要作用。Notch1和Jagged1在涎腺肿瘤以及SACC中起什么样的作用，查阅国内外文献，报道文献很少。 因此我们研究Notch1和Jagged1在SACC发生发展中的作用，探讨其与临床分期的相关性以及与复发和转移之间的联系，为SACC的早期诊断提供更有效的分子标记，同时为寻找有效治疗靶点供理论依据。 研究目的： 通过检测Notch1和Jagged1在SACC高低转移细胞系以及组织标本中的表达，分析表达与患者临床分期、转移及复发的相关性，探讨Notch1和Jagged1在SACC发生发展中的作用。 方法： 1.将ACC—M、ACC—2细胞复苏培养，部分细胞做细胞爬片后进行免疫荧光染色，确定蛋白表达部位。一抗为山羊抗人Notch1、Jagged1多克隆抗体； 2.提取两种细胞的RNA，调整至相同浓度后逆转录合成cDNA，实时定量PCR测Notch1、Jagged1基因水平，分析表达差异； 3.提取两种细胞总蛋白，Western blotting分析Notch1、Jagged1蛋白的表达，BandScan软件半定量分析表达差异。 4.免疫组织化学SABC法检测32例涎腺腺样囊性癌(SACC)、20例涎腺多形性腺瘤(SPA)、10例腮腺组织中Notch1、Jagged1蛋白表达，运用ImagePro．Plus6.0软件对各切片5个高倍镜下随机视野的图片测其累积光密度(IOD)值，采用SPSS13.0软件对结果进行检验，分析检验结果。统计分析SACC早期与晚期组、复发转移与无复发转移组等IOD值差异的意义。 结果： 1.免疫荧光染色可见Notch1、Jagged1蛋白在两种细胞胞浆内表达，其中Notch1的表达均较弱或疑似表达。 2.实时定量PCR结果表明，ACC—M中Notch1、Jagged1 mRNA均高于ACC—2，差异有统计学意义。 3.Western blotting检测发现，Jagged1在两种细胞系中的表达有明显差异，与mRNA表达一致；然而Notch1在两种细胞系中均未见表达。 4.Jagged1蛋白在正常腮腺、SPA、SACC组织中的表达水平不同，差异有统计学意义；在晚期SACC组织中的表达水平明显高于早期；发生复发和转移的病例组中表达明显高于无复发和转移组，差异有统计意义(P<0.05)。Notch1在正常腮腺组织中有表达，分布于腺导管上皮细胞中，而在SPA及各类型SACC组织中均未见表达。 结论： 在高低转移细胞系中，Notch1和Jagged1基因的表达差异明显，然而蛋白水上，Notch1的两种细胞系中未见表达；Jagged1的表达差异明显。正常腮腺、SPA、SACC组织中Jagged1蛋白表达存在着显著差异；Notch1蛋白在SPA、SACC组织中均未见表达。本研究结果表明：Jagged1与SACC的发生发展密切相关；Notch1在细胞系和组织中均未见表达，提示可能是Jagged1介导其他Notch受体的信号通路发挥作用。