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本论文建立了测定农产品中硫丹农残的两种酶联免疫吸附检测方法——板式ELISA法和管式ELISA法,并对其效能指标进行了系统评价,最低检测限分别为0.8±0.1μg/kg,1.6±0.2μg/kg。所制得的多克隆抗体特异性较强,各项参数都较为稳定。 考察了三种提取方法并进行了加标回收实验,得到的样品加标回收率为82.6%~112%。结果发现,5分钟手摇法虽然提取效果不如另外两者,但其回收率也能达到80%以上。尤其是不需要额外的仪器设备,如振荡器、匀浆机等,因此是最简便易行的提取方法,特别适用于田间现场检测。 研究了基质对ELISA实验的影响,表明0.5%的鱼皮胶磷酸盐缓冲液作为掩蔽剂在克服基质影响方面效果最好。针对不同的样品,分别采取不同的方式有效地消除了基质对ELISA分析结果的影响。而较为特殊的是茶叶样品,通过实验发现,用0.5%的FG-PBS将茶叶提取液稀释200倍并添加一种凝结剂——聚乙烯吡咯烷酮(PVP)能够很好地达到去除基质影响的效果。 在仪器分析方法的前处理过程中,通过三种净化方法对样品进行处理。通过比较后发现固相萃取法不但净化效果好,而且加标回收率较高,重现性也较好,同时还具有简便、快速的优点,因此适合应用在样品的前处理过程中。 经过和气相色谱法分析结果的比较,ELISA法与前者较为一致,从而确定了本实验所使用的ELISA方法的可行性,且比常规方法更加简便、快捷,因此可应用在大规模的田间现场快速检测中。