论文部分内容阅读
葡萄酒属自然产品,其质量和风格首先取决于原料产地的自然条件,其次才取决于栽培方式、酿造工艺等人为因素。葡萄酒多酚是影响葡萄酒质量的重要因素,决定了葡萄酒的外观、口感及微生物稳定性。葡萄酒中的多酚成分随产地气候、土壤条件、栽培技术、土壤耕作、葡萄品种、原料成熟度等不同而有所差异,因此分析葡萄酒中的多酚,建立不同葡萄酒生产厂家单品种葡萄酒多酚HPLC指纹图谱对于葡萄酒产品的质量评价和真伪鉴别有一定的意义。实验通过试凑试验法,摸索了14种单体酚的高效液相色谱测定方法,并利用该HPLC检测条件测定了不同地区不同年份的赤霞珠干红葡萄酒的多酚;同时摸索了葡萄酒多酚提取液的HPLC指纹图谱洗脱条件,建立了一年酒龄的四川九寨沟赤霞珠干红葡萄酒和云南香格里拉赤霞珠干红葡萄酒多酚的HPLC指纹图谱。研究结果如下:(1)14种单体酚的高效液相色谱测定方法:Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5μm 4.6×250mm),紫外检测波长为280nm,柱温30℃,进样量10μL,以外标法定量。流动相A:水-冰醋酸(98:2),流动相B:乙腈,流速为1ml/min。程序:0～20min,B为3%～5%;20～35min,B为5%～15%;35～50min,B为15%～30%;50～65min,B为30%～30%;65～75min,B为30%～0%。(2)不同地区不同年份赤霞珠干红葡萄酒的多酚:不同地区、不同年份的葡萄酒中均为没食子酸含量最高;不同地区葡萄酒中非类黄酮类物质差别不大,但类黄酮类物质差别较大,说明不同土壤、不同气候、不同种植条件对葡萄酒中非类黄酮物质影响不大,而对类黄酮物质影响较大。不同年份葡萄酒中,不同单体酚的含量有增有减,但总体来说,非类黄酮类物质与类黄酮类物质随年份的增加都有一定程度的降低,变化趋势基本一致。(3)葡萄酒多酚提取液的HPLC指纹图谱测定条件:Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(5μm 4.6×250mm,紫外检测波长为280nm,柱温30℃,进样量10μL。流动相A:水-冰醋酸(98:2),流动相B:乙腈,流速为1ml/min。程序:0～20min,B为3%～5%;20～35min,B为5%～15%;35～50min,B为15%～15%;50～80min,B为15%～35%;80～90min,B为35%～0%。(4)葡萄酒多酚HPLC指纹图谱本实验初步对葡萄酒多酚进行了指纹图谱研究,以香豆酸色谱峰作为参照峰,建立了四川九寨沟和四川香格里拉一年酒龄的赤霞珠干红多酚HPLC指纹图谱,其样品收集、多酚的提取以及色谱条件的优化均符合HPLC中药指纹图谱的建立原则和技术要求。通过分析指纹图谱,18个指纹峰构成了四川九寨沟干红特有的色谱指纹图谱特征,29个指纹峰构成了香格里拉干红特有的色谱指纹图谱特征。指纹图谱方法学考察结果和指纹图谱相似度评价结果均符合国家中药指纹图谱的标准,说明利用单体酚可以建立葡萄酒多酚HPLC指纹图谱,用于葡萄酒生产厂家评价产品的质量,鉴别真伪。