【摘 要】
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目的:探究NUAK2抑制结直肠癌进展和转移的分子机制。方法:我们通过构建敲减和过表达NUAK2的稳转结直肠肿瘤细胞系,进行细胞表型实验:细胞增殖实验,细胞迁移实验,基质胶细胞侵袭实验等探究肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,然后建立裸鼠肿瘤模型进行体内验证。此外,我们还进行实时定量PCR、Western Blot、免疫共沉淀、免疫荧光染色等分子生物学的方法对NUAK2影响结直肠肿瘤细胞的迁移和侵
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目的:探究NUAK2抑制结直肠癌进展和转移的分子机制。方法:我们通过构建敲减和过表达NUAK2的稳转结直肠肿瘤细胞系,进行细胞表型实验:细胞增殖实验,细胞迁移实验,基质胶细胞侵袭实验等探究肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力的变化,然后建立裸鼠肿瘤模型进行体内验证。此外,我们还进行实时定量PCR、Western Blot、免疫共沉淀、免疫荧光染色等分子生物学的方法对NUAK2影响结直肠肿瘤细胞的迁移和侵袭能力的相关机制进行了初步探究。结果:敲减NUAK2的DLD-1细胞系迁移和侵袭能力与对照相比明显增加,过表达NUAK2的DLD-1细胞系与对照相比迁移和侵袭能力减弱;在LOVO、Caco-2、HCT116细胞系中都进行了验证,结果与DLD-1细胞系基本一致。体内裸鼠转移模型中也验证了NUAK2表达量降低可以促进转移灶的发展。通过IP质谱检测分析及CO-IP实验发现PKM2和NUAK2存在相互作用;qPCR、Western Blot、免疫荧光染色,细胞迁移实验等结果分析表明NUAK2与PKM2相互作用调控表达从而影响结直肠肿瘤细胞迁移和侵袭能力的变化。结论:在结直肠癌中,NUAK2与PKM2相互作用调节结直肠肿瘤细胞的迁移和侵袭能力变化,NUAK2和PKM2表达量上调时一定程度上能够抑制结直肠肿瘤的进展和转移。
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