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阐明水稻—白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv．oryzae，简称Xoo）亲和性互作中水稻重要基因的功能，对于深入了解水稻抗／感病机制，探索更为科学有效的防治方法具有重要的意义。在前期工作中，本实验室用cDNA-AFLP技术，分析了水稻品种日本晴悬浮细胞与Xoo菌株JXOI亲和性互作时的基因表达谱，筛选到了一批在互作中差异表达的基因；其中OsBTF3在互作中上调表达，OsCtBP-A下调表达。用实时定量PCR技术，分析水稻—Xoo在植株水平上的感病互作，验证了这两个基因表达同样显著地受Xoo的调控。本研究对OsBTF3和OsCtBP-A进行了鉴定，并为进一步分析它们的功能奠定基础。根据OsBTF3和OsCtBP-A基因序列，设计和合成了特异性引物，通过RT-PCR方法扩增了部分和全长基因片段，将目的片段克隆到pMD-18T Easy载体上，进行序列测定。通过比对发现克隆的目的基因序列与GenBank公布的序列完全一致。生物信息学分析表明，OsBTF3基因定位于第3号染色体上，具有5个外显子和4个内含子，成熟mRNA全长528核苷酸；可编码具有175个氨基酸的蛋白质，具有NAC保守结构域；推测它可能与淋巴细胞中BTF3一样，参与了新生多肽的折叠。OsCtBP-A定位于第3号染色体上，具有6个外显子和5个内含子，成熟mRNA全长1140核苷酸；可编码具有424个氨基酸的蛋白质，具有2-Hacid dh C （D-isomer specific 2-hydroxyacid dehydrogenase）保守结构域，推测该蛋白可能为C’结合蛋白A。将OsBTF3全长cDNA序列克隆到原核表达载体pET21b上，得到pET21-BTF3，将其转化到大肠杆菌表达菌株BL21（DE3）pLysS中，加入IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明，试验获得了一条与预测分子量大小相当的明显条带。用GFP融合蛋白技术进行了OsBTF3亚细胞定位研究。将OsBTF3插入到35S-gfp载体中，构建了含有OsBTF3-gfp融合基因的双元载体35S-OsBTF3-gfp，用基因枪转化方法转化洋葱表皮细胞，用激光共聚焦显微镜观察融合基因的瞬时表达，发现OsBTF3-gfp融合基因主要在细胞核内表达。分别用含OsBTF3基因过量表达载体pCAMBIA1300S-OsBTF3和RNA干扰载体pCAMBIA1300S-OsBTF3RNAi的农杆菌LBA4404菌株侵染水稻品种日本晴愈伤组织，经潮霉素抗性筛选、分化等过程，分别获得了OsBTF3过量表达和RNAi的抗性转化苗。将OsCtBP-A基因片段克隆到pTCK303载体，构建了用于OsCtBP-A基因RNAi分析的双元载体pTCK303-OsCtBP-A，用农杆菌介导的转化方法，转化水稻品种日本晴愈伤组织，得到了抗潮霉素抗性转化苗。PCR扩增和GUS染色法检测表明，试验获得了T0代转基因水稻植株。