柔枝莠竹(Microstegium vimineum)生防真菌的潜力评估和寄主范围测试

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柔枝莠竹(Microstegium vimineum)是禾本科一年生草本植物,原产自东亚、东南亚。由于人类活动上世纪进入美国,由于其高光合效率和种子生命力强等原因,在美国的中东部迅速扩张,目前已经成为该国的一种恶性入侵杂草。柔枝莠竹的入侵给当地的生态带来巨大影响,限制了当地植物的生存空间,影响部分生物栖息地,改变土壤理化性质及生物组成,给成功防除柔枝莠竹后的生态恢复带来困难。为了防治其危害,已经尝试使用物理、人工、生物和化学等方法,但效果十分有限。利用生物防治的方法控制外来入侵杂草已经有成功案例,但是,选择该方法防治该草的报道仅有一例。主要原因是对柔枝莠竹的自然天敌还缺乏系统研究,已经报道的天敌生物特别是致病菌不到10种,多数也是严重的农作物病害,因此尚没有合适的生物防除候选因子。所以,十分有必要开展柔枝莠竹种群自然病害的调查和病原物的分离鉴定,致病菌的筛选及其致病力评估和安全性评价,为生物防治提供有潜力的候选菌株。从2014年采集自全国各地的柔枝莠竹病叶样本上总共分得236株真菌,经过接种到离体柔枝莠竹叶片上测试致病力,最终获得了 65株致病菌株。为了确定65株致病菌菌株的种类,培养致病菌诱导产孢,根据分生孢子及孢子梗形态进行鉴定,可以确定到致病菌的属类。随后使用ITS序列分子标记,并对这些菌株进行PCR扩增并测序,获得它们的ITS序列信息,在GenBank上用Blast程序比对出致病菌的种类。最终从65株菌株中鉴定出7个属16种,包括甘蔗平脐蠕孢Bipolaris sacchari、狗尾草平脐蠕孢Bipolarissetariae、麦根腐平脐蠕孢Bipolarissorokinana、玉蜀黍平脐蠕孢Bipolaris maydis、稷平脐蠕孢 Bipolaris panici-miliace、稻平脐蠕孢 Bipolaris oryzae、玉米平脐孺胞Bipolariszeae、多主棒孢 Corynespora cassiicola、嘴凸脐蠕孢Exserohilum rostratum、新弯孢 Curvularia lunata、膝曲弯孢 Curvularia geniculata、中隔弯孢Curvularia intermedia、稻黑孢霉 Nigrospora oryzae、球黑孢霉Nigrospora sphaerica、草茎点霉Phoma herbarum、极细链格孢Alternaria tenuissima。之后接种各致病菌的孢子悬浮液到健康的柔枝莠竹离体叶片上,进行致病力的初步测试,根据发病情况和ED50,ED90的值筛选出了 8株强致病性的致病菌,分别是狗尾草平脐蠕孢,麦根腐平脐蠕孢各2株,玉蜀黍平脐蠕孢,新月弯孢,株膝曲弯孢和草茎点霉各1株继续进行致病力的活体测试,即接种致病菌的孢子悬浮液到健康的柔枝莠竹幼苗上,进一步评价其对柔枝莠竹的致病性。从活体致病性的结果中再筛选出狗尾草平脐蠕孢和玉蜀黍平脐蠕孢各1株,麦根腐平脐蠕孢2株用于网室小区防除试验,评估致病菌在野外自然环境下对柔枝莠竹的致病性。对活体试验中的8株致病菌同时进行寄主范围离体测试,试验结果表明8株致病菌对非禾本科的植物的离体叶片基本无致病性,对不同植物的致病性因菌而异。在寄主范围活体测试中,4株用于网室小区防除试验的致病菌对玉米幼苗和有些草坪草有一定程度的致病性,对水稻和小麦相对安全,且对其他农田杂草有一定的防治效果。根据致病菌的致病性测试和寄主范围测试,狗尾草平脐孺胞YXQST 2-1和玉蜀黍平脐孺胞MLL 1-5可作为理想的生防菌株来防治柔枝莠竹和一些主要的农田杂草(千金子、马唐、稗草),但不能用于玉米田和黑麦草、假俭草、高羊茅、狗牙根这些草坪。
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