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从许多种类的两栖动物特别是蛙属(rana)动物中已经分离到一类线型,两性,带正电荷的抗菌肽。由于该类抗菌肽能够渗入并破坏细菌细胞膜,而且不易诱发细菌产生耐药性,所以其抗菌作用能力越来越引起人们的注意。沼水蛙(Hylarana guentheri)广泛分布于中国南部,在两栖动物种类和数量不断减少的同时,它通常仍是当地的优势物种。本文介绍了运用高效液相色谱和液质联用技术对沼水蛙皮肤分泌物中抗菌肽进行分离纯化,应用Edman降解法和串联质谱对多肽进行结构鉴定,经过互联网数据库的搜索和序列比对,结果证明分离到了5种新型抗菌肽AMP1 ( GFSSLFKAGAKYLLKSVGKAGAQQLACKAANNCA )、AMP2 (GVITDALKGAAKTVAAELLRKAHCKLTNSC)、AMP3 (VIDDLKKVAKKVRRELLCKKHHKKLN)、AMP4 (SIWEGIKNAGKGFLVSILDKVRCKVAGGCNP)和AMP5(FLPLLFGAISHLL-NH2),并且对其作了抗菌活性测定,发现它们对革兰氏阳性和阴性细菌具有一定的抗菌作用,对白色假丝酵母均无抗菌作用。AMP1对金黄色葡萄球菌FDA209P的MIC为14.9μg/mL;AMP2对金黄色葡萄球菌FDA209P的MIC为16.5μg/mL,对大肠杆菌O111的MIC为8.2μg/mL,对大肠杆菌ATCC25922的MIC为8.2μg/mL;AMP3对金黄色葡萄球菌FDA209P的MIC为35.5μg/mL;AMP4对金黄色葡萄球菌FDA209P的MIC为9.8μg/mL,对大肠杆菌O111的MIC为19.6μg/mL,对大肠杆菌ATCC25922的MIC为9.8μg/mL;AMP5对金黄色葡萄球菌FDA209P的MIC为44.3μg/mL。应用3’- and 5’- RACE策略对抗菌肽brevinin-2家族的新成员AMP2和AMP4进行了cDNA克隆。沼水蛙皮肤分泌物中抗菌肽的分离鉴定为首次报道。