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目的:已证实脂肪酸辅酶A连接酶4(fatty acid CoA ligase 4,FACL4)抑制剂Triacsin C对HepG2细胞有明显凋亡诱导作用的基础上,本实验进一步探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:体外培养HepG2肝癌细胞,Triacsin C以不同浓度或不同时间干预后,应用流式细胞仪检测细胞线粒体跨膜电位变化,应用免疫细胞化学S-P染色法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、p53在细胞中的表达情况,应用比色法检测细胞凋亡相关蛋白酶Casepase-3、Casepase-8、Casepase-9的活性变化。结果:1、流式细胞仪结合Rhodamine123染色结果显示Triacsin C作用后HepG2细胞线粒体跨膜电位下降,且呈时间、剂量依赖性。2、S-P免疫组化染色结果显示:空白对照组HepG2细胞p53和Bcl-2蛋白均呈高表达,Bax呈相对低表达;Triacsin C作用后p53和Bcl-2蛋白表达下降,且p53较Bcl-2明显,Bax蛋白表达增加,上述变化均呈剂量依赖性,与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。3、比色法检测发现Triacsin C诱导HepG2细胞凋亡过程中,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白酶活性呈时间依赖性及剂量依赖性增高,Caspase-3和Caspase-9增高尤其明显,与对照组相比有显著性差异(p<0.01)。结论:1、FACL4抑制剂Triacsin C作用于HepG2细胞后线粒体膜电位明显下降,提示Triacsin C诱导HepG2细胞凋亡的主要机制可能是线粒体介导通路,即通过引发线粒体损伤或功能紊乱而诱导凋亡。2、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及p53可能是Triacsin C诱导HepG2细胞凋亡的重要调控因子。3、Triacsin C诱导HepG2细胞凋亡过程中可能主要通过激活Caspase-9途径而启动Caspase级联反应。