目的通过构建人端粒酶逆转录酶N-端(hTERT-n)蛋白原核表达系统(前期工作),并分离提纯获得高纯度的hTERT-n蛋白,以该蛋白为抗原利用间接ELISA技术检测癌症患者、良性疾病患者和正常人血清中抗hTERT自身抗体水平,为血清抗hTERT自身抗体能否作为一种新的肿瘤标志物提供实验依据。方法1.重组表达菌pMAL-c5X-hTERT-n-TB1经0.3 mmol/L IPTG诱导表达目的蛋白,12%SDS-PAGE初步验证目的蛋白表达情况;2.用直链淀粉树脂层析柱和BioLogic DuoFlow蛋白纯化仪提纯目的蛋白,经SDS-PAGE、考马斯亮蓝染料结合法、Western blot分别测定蛋白质大小和浓度及鉴定蛋白。3.间接ELISA法检测108例肺癌、215例乳腺癌、60例直肠癌、59例结肠癌、105例肺炎患者和120例正常人血清抗hTERT-n自身抗体的水平,检测结果进行统计分析,比较抗hTERT-n自身抗体水平在不同种类癌症、不同病理类型、不同分期和不同年龄段癌症患者的差异。结果①成功获得高纯度重组hTERT-n蛋白,浓度为1.0 mg/mL;②间接ELISA法检测血清抗hTERT-n自身抗体结果发现:正常对照组、肺炎组和肺癌组患者血清抗hTERT-n自身抗体测定浓度(x±SE)分别为4.67±0.19U/mL、5.86±0.28 U/mL 和 6.95±0.20 U/mL;肺癌组和肺炎组高于正常对照组(P<0.05),肺癌组高于肺炎组(P<0.05);在不同病理类型肺癌患者中.肺鳞癌患者血清中抗hTFRT-n自身抗体浓度为9.50±0.25 U/mL,高于肺腺癌患者(6.84±0.24 U/mL,P<0.05);乳腺癌、直肠癌、结肠癌组患者血清抗hTERT-n 自身抗体测定浓度(x±SE)分别为 6.53±0.21U/mL、7.47±0.31 U/mL和6.76±0.27 U/mL,高于正常对照组(P<0.05);抗hTERT-n自身抗体在中晚期肿瘤患者中浓度明显高于早期肿瘤(P<0.05);年龄因素对该抗体水平无影响。结论癌症组患者血清中抗hTERT-n自身抗体水平明显高于良性疾病组和正常对照组.提示血清抗hTERT-n自身抗体可做为一项新的广谱肿瘤标志物。