琼胶寡糖的抗氧化以及诱导胃癌细胞BGC-823凋亡的研究

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琼胶是从红藻类海藻中提取的天然多糖胶体,在食品、医药卫生等方面有广泛的应用。但由于琼胶凝固性强,不容易被吸收,因此在应用方面受到很大限制。而琼胶经降解后主要形成由琼二糖的重复单位连接而成的寡糖,因此琼胶寡糖就可以克服上述缺点,水溶性好,有利于人体吸收,是值得深入研究的一种新型生物寡糖。 本实验采用聚合度在2到10的各种纯化琼胶寡糖,对其细胞内外的抗氧化活性进行了检测,包括DPPH自由基清除活性、羟基自由基的清除活性、细胞内的抗氧化能力检测。细胞外的抗氧化结果表明,在各种琼寡糖中,琼六糖能够有效地清除DPPH自由基,在浓度为5mg/ml时,其清除率就已经达到75﹪左右。而各种寡糖清除羟基自由基地能力非常接近,在浓度为20mg/ml时,其清除效率可以达到80﹪左右。对细胞内地抗氧化作用的研究结果认为,琼六糖能够有效地抑制细胞内地活性氧的产生。 对琼胶寡糖的细胞毒活性检测中发现,琼寡糖在细胞毒活性方面表现出了明显的选择性致死现象,各种聚合度的寡糖对正常细胞L-02都没有致死性,但是却能够特异性的对胃癌细胞BGC-823有较强的杀伤性,其中琼四糖表现出最高的活性,同时该糖对宫颈癌细胞Hela也有一定的细胞毒活性。随后,以胃癌细胞BGC-823为研究对象,通过AO/EB荧光染色法、Horchst荧光染色法均观察到了凋亡现象。DNA Ladder实验我们观察到了DNA降解后的梯状条带。琼寡糖处理后的TUNEL分析我们也看到了明显的荧光。最终我们认为,琼四糖的细胞毒现象主要是通过诱导细胞凋亡产生的。
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