RNA干扰FoxQ1基因对非小细胞肺癌生物学特性的影响

来源 :南通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Ryan
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目的通过特异性siRNA沉默人非小细胞肺癌中FoxQ1基因的表达,观察对非小细胞肺癌生物学特性的影响以及协同化疗药物的作用。方法1.用实时荧光定量RT-PCR和Western Blot筛选高表达FoxQ1基因的肺癌细胞株。2.构建针对人FoxQ1基因的小干扰RNA,实时荧光定量RT-PCR和Western Blot方法筛选合适的转染浓度和沉默效果最好的干扰序列。3.通过CCK-8方法、Transwell小室模型、流式细胞术及Western Blot方法检测沉默FoxQ1基因后对肺癌细胞增殖、侵袭、凋亡及化疗敏感性的影响。4.筛选稳定转染细胞株,Balb/c裸鼠成瘤实验观察FoxQ1对裸鼠致瘤性的影响。结果1. FoxQ1基因和蛋白在SPC-A-1中表达最高,NCI-H1395细胞中次之,在A549, HCC827细胞中呈低表达。2.干扰人肺癌细胞中FoxQ1基因后,癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力较对照组明显下降,凋亡能力明显增加(P<0.05)。3.致瘤实验表明沉默FoxQ1基因的细胞接种裸鼠后,成瘤能力较对照组明显下降(P<0.05)4. FoxQl基因干扰后,肺癌细胞对化疗药物的敏感性明显增强,并协同顺铂抑制裸鼠肿瘤的生长。结论1.干扰FoxQ1基因后,可降低其在非小细胞肺癌细胞中的表达。2.沉默FoxQ1基因的表达可明显抑制非小细胞肺癌的增殖侵袭迁移能力,增加化疗敏感性,诱导凋亡,并对裸鼠肿瘤的成瘤具有一定的抑制作用。3.靶向干预非小细胞肺癌中FoxQ1基因可为肺癌的治疗提供实验室基础和理论依据。
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