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白粉病是世界范围内葫芦科蔬菜的一种常见病害,对黄瓜、甜瓜等都能造成严重损失。白粉病主要危害叶片,也可侵染茎和叶柄,瓜类白粉病通常在生长中、后期发病严重,导致果实品质下降和产量损失。利用生物防治防控瓜类白粉病可以减少化学农药的使用和缓解病菌的抗药性,并且生物防治作为一种新兴的安全、高效的病害防治手段已经得到广泛认可。生防菌LJ1是从土壤中分离得到的一株对瓜类白粉病有良好防效的生防细菌。田间药效试验发现,在施药后14d时其对黄瓜白粉病的防效可达83.45%。为明确该菌株的分类地位、生防效果以及初步探索其作用机理和评价在使用过程中对动植物的影响,本文对生防菌株LJ1进行了分类鉴定、诱导抗病性研究以及生物安全性评价等试验。依据该株菌的形态特征和16S rDNA序列系统进化分析,推断生防菌LJ1是芽孢杆菌属。通过测定厌氧性、生长温度、耐盐性、抗生素敏感性、运动性、糖醇产酸、碳源利用以及其他生理生化指标,并结合《伯杰细菌鉴定手册》,最终确定生防菌LJ1为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。为研究LJ1防治病害的作用机制,用LJ1发酵上清100倍稀释液喷施黄瓜幼苗,测定了黄瓜叶片中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)及水杨酸等与诱导抗病性相关的酶活性和信号分子水杨酸的变化。结果显示,经过LJ1发酵液处理后4种酶的活性在不同时间点均有一个骤增的过程,其活性显著高于对照;经LJ1发酵液处理后第3d开始黄瓜叶片中水杨酸的含量持续增长,并与对照达到极显著差异(P<0.01),而对照组水杨酸在处理3-5d时有所增长,5d后含量基本保持恒定。说明LJ1发酵液中可能存在诱导黄瓜产生抗病性的物质。为检测生防菌LJ1的生物安全性。测定了LJ1发酵液对小鼠的急性毒性,还测定了谷丙转氨酶(AST)、谷草转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)以及6种血相指标。结果发现:生防菌LJ1急性经口毒性和急性经皮毒性均为“低毒”级(LD50>4640mg/kg);处理3d后小鼠的AST、ALT和ALP3种酶在血清中含量明显提高,与对照差异显著(P<0.05),而14d后3种酶的含量基本恢复正常水平,与对照组相比无显著差异。说明LJ1发酵液灌胃初期对小鼠的脏器功能有一定影响,但在14d内发酵液对脏器的影响会被小鼠机体代谢至正常水平,据此推断生防菌LJ1发酵液对动物安全。黄瓜种子催芽后用不同浓度的生防菌发酵液浸种以及在一片真叶时进行叶面喷施等处理,观察黄瓜的生长状况并测定不同处理组的根围和叶表微生物群落动态变化。结果显示:生防菌LJ1对黄瓜出苗没有影响。不同浓度浸种和叶面喷施处理后,黄瓜幼苗生长状况均明显优于对照组,并且100倍液处理后对黄瓜的促生效果最为明显,株高、茎周长、鲜重和干重等指标均显著高于对照(P<0.01)。浸种和叶面喷施两种处理对根围和叶表细菌变化趋势与生防菌发酵液的使用浓度呈现出相关性,随着稀释倍数的增加,细菌生物量递减,并且大多数细菌平板培养形态特征与生防菌LJ1极其相近,可以推断生防菌LJ1可能具有定殖能力;叶面喷施对放线菌的影响较小,而在低浓度浸种处理中放线菌数量有所增加;不同处理对根围和叶表真菌的生长均表现出良好的抑制作用,说明生防菌LJ1发酵液中可能含有抗菌物质,或者存在能够诱导黄瓜产生抗病性的物质,并且诱导后分泌的抗性物质对真菌具有广谱抗性。