【摘 要】
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第一部分:ECV304细胞体外二维培养形成管状结构的观察.目的:观察ECV304细胞体外二维培养能否形成管状结构.方法:我们把自然转化的人脐静脉内皮细胞—ECV304细胞株引入实验,不
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第一部分:ECV304细胞体外二维培养形成管状结构的观察.目的:观察ECV304细胞体外二维培养能否形成管状结构.方法:我们把自然转化的人脐静脉内皮细胞—ECV304细胞株引入实验,不用额外的生长因子,不涂布基质,选择低血清浓度、低细胞种植密度或常规长期培养等条件进行二维培养.结果:在多种条件下,二维培养的ECV304细胞都能形成管状结构,结论:提示ECV304细胞可能是研究体外血管新生良好的内皮工具.第二部分:体外血管新生三维模型的构建.目的:以ECV304细胞为内皮工具,构建体外血管新生的三维模型.方法:以自制的鼠尾胶原制成的凝胶作为细胞外基质,在凝胶上面种植ECV304细胞,长满单层后用含碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)的培养液刺激,用倒置相差显微镜观察ECV304细胞入侵凝胶的情况.结论:自制的鼠尾胶原凝胶可以为内皮细胞提供良好的细胞外基质微环境,再加上必要的生理、病理信号刺激,将能够诱导ECV304细胞表现出血管新生中的迁移、增殖、发芽等步骤.ECV304细胞三维凝胶模型可用来研究血管新生.第三部分:心肌成纤维细胞诱导体外血管新生作用初探.目的:探讨心肌成纤维细胞在血管新生中的作用.方法:分离培养乳鼠心肌成纤维细胞(CF)并收集其条件培养液(CF-CM),用其作为ECV304细胞的培养液,<3>H-TdR掺入法检测CF-CM对ECV304细胞增殖活性的影响,并采用体外三维模型检测其是否能诱导ECV304向胶内入侵、发芽.结论:心肌成纤维细胞条件培养液有促进ECV304细胞增殖和迁移的作用,即有促血管新生作用.
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