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类风湿性关节炎(RA)——属于藏医“真布病”范畴,在藏区是一种常见疑难性疾病,其发病率高,致残率高,并可累及多器官、多系统引起系统性疾病。藏药浴疗法是藏医对RA临床效果确切的常用手段,而“五味甘露”药浴是藏医临床上治疗RA主要使用的成方制剂。藏药浴已经成为国家非物质文化遗产保护项目,以及国家中医药管理局藏医重点专科。目前,对藏药浴“五味甘露”的研究主要集中在临床疗效与浴后护理方面,藏药浴对调整机体免疫系统的显效性和高治愈率的研究也比较广泛。但从细胞层面对藏药五味甘露药浴颗粒作用于机体的机制缺乏系统科学的研究,对其抗RA的分子作用机制的研究尚不深入。目的:从藏医学理论及藏药浴文化内涵入手,以藏药浴临床经验为指导,开展藏药五味甘露药浴颗粒药效及其作用机制实验研究。从整体动物模型层面,考察五味甘露药颗粒在治疗RA大鼠关节炎症上的药效作用;从细胞层面,分析其对RA大鼠滑膜组织中细胞因子的影响以及对蛋白表达的调控作用;从分析生物学层面,筛选与RA相关的分子信息,探讨五味甘露药浴颗粒对RA滑膜细胞的JAK-STAT炎症信号通路调控机制。方法:1.文化研究:从医学人类学的视野,结合具体的藏医学历史和藏族沐浴文化背景,整合文献学、田野调查等研究方法来阐释藏药浴的文化内涵。2.实验研究:将大鼠造模经藏药浴治疗后:①采用致炎后足容积测量、免疫器官的脏器系数、及踝关节病理形态的比较,评价五味甘露药浴颗粒对AA大鼠的治疗效果;②采用酶联反应、免疫组化法检测并分析五味甘露药浴颗粒对滑膜组织中细胞因子及蛋白表达的干预效应;③采用基因芯片技术,检测滑膜细胞中的JAK-STAT信号通路中相关信号分子的表达,并用RT-PCR法进行验证,探讨五味甘露药浴颗粒对RA滑膜细胞的JAK-STAT信号通路的调控机制。结果:1.拥有一千多年历史的藏药浴蕴含着丰富的藏族沐浴文化,并以藏医药理论为指导在临床广泛开展。它集医疗、养生、保健等多种功能于一体,是具有历史、文化、经济等多重价值的藏医外治疗法。2.五味甘露药浴颗粒高剂量组(11.80 g·L-1)、中剂量组(5.90 g·L-1)低剂量组(2.95 g·-1)AA大鼠原发性足肿胀度均有减轻,滑膜细胞增生、炎细胞浸润、关节软骨破坏均有不同程度的改善;血清中白细胞介素-1p(IL-1β)肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、生长因子(EGF、bFGF、PDGF-BB)、前列腺素E2 (PGE2)、基质金属蛋白酶(MMP-3、TIMP-1)的含量均有不同程度的下降。该药可以抑制滑膜细胞JAK-STAT信号通路的激活,使P-STAT1、P-STAT3、IL-6表达下降,IL-10表达上升;在JAK-STAT信号通路上I12rb、Mp1、Stam等相关信号分子表达上调,PIAS1、PIAS3、SOCS4、EPO、IFNGR2等相关信号分子表达下调。结论:1.藏药浴既是生物学意义上的科学,也是人类学意义上的文化,具有自然科学和人文科学的双重特征。要充分理解藏医药文化内涵,把人文文化和科学文化相融,借鉴西医的科学技术手段开展对藏药浴的现代研究。2.藏药浴(五味甘露药浴颗粒)在类风湿关节炎滑膜病理改变的过程中,通过下调致炎因子(TNF-α、IL-1,6)等、上调抗炎因子(IL-10)来激活体内免疫系统,抑制成纤维样滑膜细胞分泌各类细胞因子对滑膜的刺激,来控制关节滑膜炎症。对滑膜细胞JAK-STAT炎症信号通路中相关信号分子的表达有良性调节作用,进而调控细胞核内基因转录,而最终达到抑制RA滑膜细胞增殖、促进细胞凋亡、抗炎消肿、保护关节骨与软骨的目的。