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目的本课题目的在于研究民间药筋骨草抗疲劳抗氧化作用及主要成分提取工艺。主要分三部分,第一部分研究筋骨草对小鼠和大鼠的抗疲劳抗氧化作用;第二部分研究筋骨草黄酮和多糖的体外抗氧化活性;第三部分研究筋骨草中主要有效成分总黄酮、多糖和生物碱的最佳提取工艺。方法第一部分:将72只昆明种健康小鼠随机分成空白对照组,肉苁蓉组(5.0 g/kg),家种筋骨草组(5 g/kg)、野生筋骨草组(2.5、5、10 g/kg),每组12只;将48只SD大鼠随机分成空白对照组,肉苁蓉组(2.5 g/kg),家种筋骨草组(2.5 g/kg)、野生筋骨草组(1.25、2.5、5.0 g/kg),每组8只,经口灌胃15 d。常温不负重游泳实验,测力竭游泳时间,BUN、糖元和MDA含量以及SOD活力。第二部分:以Vc为对照,采用DPPH、ABTS和FRAP法对民间药筋骨草黄酮和多糖抗氧化活性进行综合评价。第三部分:通过单因素实验和正交实验,分别研究乙醇浓度、超声时间、料液比和提取温度对筋骨草总黄酮提取率的影响,料液比、超声时间、提取次数和提取温度对筋骨草多糖提取率的影响,料液比、乙醇浓度、提取温度和超声时间对筋骨草生物碱提取率的影响。优选出超声辅助提取筋骨草总黄酮、多糖和生物碱的最佳工艺,并测定野生和家种筋骨草中总黄酮,多糖和生物碱含量。结果第一部分:研究表明民间药筋骨草2.5、5、10 g/kg三个剂量均可以延长小鼠力竭游泳时间,降低BUN含量,增加糖元储备,减少MDA的堆积,增强SOD活力,以10 g/kg剂量效果最佳,大鼠在抗疲劳抗氧化主要指标上也有相同的效果,以5 g/kg剂量效果最佳。第二部分:研究发现筋骨草黄酮对DPPH自由基(IC50=42.91μg/m L,最大清除率为88.57%)、ABTS自由基(IC50=44.61μg/m L,最大清除率为92.86%)的清除能力较好,对Fe3+的还原能力(AEAC=5380μmol/g)比较强;筋骨草多糖对DPPH自由基(IC50=46.96μg/m L,最大清除率为84.44%)、ABTS自由基(IC50=49.56μg/m L,最大清除率为93.21%)的清除能力较好,对Fe3+的还原能力(AEAC=3708μmol/g)比较强。第三部分:研究表明得到从筋骨草中提取总黄酮的最佳工艺:药材加30倍的70%乙醇,50℃超声提取2次,每次30 min,野生筋骨草总黄酮提取率为4.78%,含量为47.82 mg/g;家种筋骨草总黄酮得提取率为2.01%,含量为20.06 mg/g。多糖提取的最佳工艺:药材加30倍的蒸馏水,80℃超声提取3次,每次25 min,野生筋骨草多糖提取率为3.55%,含量为35.55 mg/g;家种筋骨草多糖提取率为2.05%,含量为20.50 mg/g。生物碱提取的最佳工艺:药材加25倍的60%PH=1乙醇溶液,50℃水浴1 h后超声15 min,野生筋骨草生物碱提取率为0.072%,含量为0.72 mg/g;家种筋骨草生物碱提取率为0.099%,含量为0.99 mg/g。结论民间药筋骨草水煎液对小鼠和大鼠具有明显的抗疲劳抗氧化作用,且不存在动物种属差异。筋骨草黄酮和多糖具有较强的抗氧化活性,是较好的天然抗氧化剂。并且筋骨草中黄酮、多糖、生物碱含量丰富,优选出的超声提取工艺提取率高,稳定、可行。