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目的:
通过对人冠部脱矿牙本质切片的免疫组化染色观察,了解基质金属蛋白酶8在牙本质中的存在情况,进一步探讨基质金属蛋白酶8在牙本质中的分布规律,以期为后续研究提供实验基础和理论依据。本课题是关于基质金属蛋白酶8对树脂粘接影响序列课题中的前期研究。
材料和方法:收集在中山大学附属口腔医院口腔颌面外科门诊因治疗需要拔除的前磨牙和第三磨牙,共计39颗。按性别、位置和年龄分组。拔除后立即在冰浴下去除牙根、牙髓以及牙龈。置于4%的福尔马林溶液中固定72小时。固定后在水冷却下以低速金刚砂裂钻取牙冠近远中向或颊舌向中1/3厚1.5mm的牙体组织,浸泡于10%EDTA中脱矿5周,石蜡包埋,切片,以兔抗人基质金属蛋白酶8多克隆抗体进行免疫组化染色。光镜下观察标本的成牙本质细胞层、前期牙本质层、成熟牙本质深中浅层和邻近釉牙本质界5μm的牙本质6个区域。拍摄图片,Imageproplus6.0软件对各区域的平均光密度值进行测量。
结果:
人冠部牙本质全层中均可见基质金属蛋白酶8的免疫染色。
在免疫染色强度上,成牙本质细胞层染色最强,前期牙本质层、邻近釉牙本质界5μm区、牙本质深层、牙本质中层和牙本质浅层依次降低。各层的平均光密度值依次为0.186±0.054/pix2、0.143±0.069/pix2、0.092±0.048pix2、0.032±0.025/pix2、0.021±0.019/pix2和0.020±0.018/pix2。
成牙本质细胞层中染色主要位于细胞内;前期牙本质层中染色位于牙本质小管和管周牙本质;牙本质深层主要分布于管间牙本质,在靠近前期牙本质约100μm的区域内牙本质小管也有染色;牙本质中层和浅层染色位于管周牙本质,牙本质小管内几乎没有染色。釉牙本质界区有沿釉牙本质界分布的免疫染色线。
结论:
基质金属蛋白酶8存在于人冠部牙本质全层中。前期牙本质含量最高,邻近釉牙本质界5μm区、牙本质深层、牙本质中层和牙本质浅层依次降低。