Luman募集因子（Luman recruiting factor，LRF）又称为CREB3调节因子（CREB3 regulate factor，CREBRF）是一种碱性亮氨酸拉链蛋白转录因子。在2008年，Lu Ray等人利用酵母双杂交技术从人脑的cDNA文库中筛选得到的一个新基因。LRF mRNA在成年小鼠组织中广泛表达，这就预示着LRF在哺乳动物机体内可能具有广泛的生物学意义。研究显示，LRF-/-基因敲除小鼠中糖皮质激素受体（GR）表达量异常升高，催乳素（PRL）的分泌显著下降，导致产后母鼠母性行为的缺失。本实验室前期研究发现，在小鼠闭锁卵泡的颗粒细胞中LRF蛋白表达量显著上升，揭示LRF通过内质网应激（ERS）介导的凋亡通路对颗粒细胞发挥促凋亡作用。根据现有的研究结果，我们推测在雄性动物生殖领域LRF可能具有重要的生理功能。　　本试验采用免疫组化、qRT-PCR、免疫荧光和siRNA干扰等技术检测了LRF在不同发育阶段的小鼠睾丸和性成熟小鼠附睾内的表达规律，分析了LRF对小鼠睾丸间质细胞中睾酮合成以及相关类固醇合成酶表达的影响，为揭示LRF在雄性小鼠生殖系统中的功能奠定基础。本试验获得的主要结果包括：　　（1）收集小鼠出生后不同发育阶段的睾丸和性成熟的附睾，应用免疫组织化学和qRT-PCR技术，检测LRF在从出生到性成熟不同发育阶段的小鼠睾丸以及性成熟的附睾头、附睾体和附睾尾中的表达定位。LRF蛋白在小鼠附睾中精子头部和尾部呈阳性表达。LRF蛋白特异性地表达于21 d后的小鼠睾丸的间质细胞中，且LRF mRNA表达水平与日龄相关；LRF蛋白在小鼠睾丸间质细胞的细胞核和细胞质中均有表达，以胞质为主。上述结果提示，LRF可能参与了睾酮生成以及精子成熟的调节过程。　　（2）LH/hCG是调节睾丸间质细胞中睾酮合成的主要激素。在体1 IU和5 IU hCG腹腔注射雄性小鼠，注射后12 h和24 h可显著增加血清中睾酮浓度；12 h时，5 IU hCG显著下调LRF mRNA的表达，而24 h时，1 IU和5 IU hCG均可显著下调LRF mRNA的表达。　　（3）体外分离培养小鼠原代睾丸间质细胞且纯度达95%以上，hCG给与处理后呈时间和剂量依赖性下调LRF mRNA的表达，且与培养上清液中睾酮浓度和3β-HSD表达水平负相关。　　（4）成功构建了小鼠LRF的过表达载体pcDNA3.1（+）-LRF，筛选获得si-LRF的有效干扰片段。采用siRNA干扰小鼠原代睾丸间质细胞中LRF的表达，可显著的降低培养上清液中睾酮浓度和类固醇合成酶StAR、3β-HSD、P450scc以及P450c17的表达；而过表达LRF可以显著上调StAR的表达。另外，过表达和干扰LRF对小鼠睾丸间质细胞的增殖没有明显影响。　　综上所述，本研究结果表明LRF特异性地表达于性成熟后的小鼠睾丸间质细胞中， LRF通过调节类固醇合成酶的表达参与睾酮合成的调控过程。