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目的研究表明,野生人剪切修复基因着色性干皮病基因D （Xeroderma Pigmentosum D,XPD）在重要的DNA修复路径----核苷酸切除修复中有关键作用,是DNA修复路径中的重要因子。XPD发生基因突变时,肿瘤的易感性会增高。本课题主要研究野生型XPD基因对肝癌SMMC-7721细胞生长的影响,探讨XPD基因抑制肝癌SMMC-7721细胞生长的机理。方法用碱裂解法从制备好的大肠杆菌中提取空载质粒pEGFP-N2及重组质粒pEGFP-N2-XPD,并用KPNⅠ、BGIⅡ和SPHⅠ对提取出的质粒进行酶切鉴定。实验分三组,重组质粒XPD-N2组、以空载质粒N2,及用与XPD-N2、N2具有相同遗传背景和代数的肝癌SMMC-7721细胞作为两个空白对照组。用脂质体分别瞬时转染三组细胞。并在荧光显微镜下检测转染后绿色荧光蛋白基因表达情况。使用流式细胞仪监测细胞周期,统计细胞各周期的百分率。提取三组细胞总RNA,合成cDNA,用聚合酶链反应（PCR）检测三组细胞中p27、Cdk2及Cdk7表达情况,Western blot法检测细胞中p27、Cdk2及Cdk7表达量变化,在96孔板中进行MTT试验以观察细胞增殖的活力变化。结果1、提取出的重组质粒pEGFP-N2-XPD用酶切鉴定,进行电泳色带与Genebank中公布的人类XPD完整mRNA序列NM000400分析预期相吻合。2、转染质粒后40h,在荧光显微镜下观察到在SMMC-7721- pEGFP-N2,SMMC-7721- pEGFP-N2-XPD两组中有绿色荧光蛋白的表达。3、流式细胞仪监测到与其它两对照组相比,转染了pEGFP-N2-XPD重组质粒的肝癌细胞数进入S期明显减少,停滞在G1期。4、应用RT-PCR、Western blot检测SMMC-7721- pEGFP-N2-XPD细胞与SMMC-7721- pEGFP-N2、SMMC-7721两对照组显示:其XPD表达明显升高（P<0.05）。p27相对表达量升高（P<0.05）,Cdk7相对表达量明显减少（P<0.05）。5、MTT结果显示:与两对照组相比,SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞增殖率明显降低（P<0.05）。结论野生型XPD基因影响抑癌基因p27、癌基因CDK7基因的表达,来降低Cdk2基因的活性,从而抑制了尚未起始的DNA复制起始点的发动,肝癌细胞周期停滞在G1期,使细胞进入S期发生障碍,细胞复制显著减少;野生型XPD基因可以通过DNA损伤检控点抑制肝癌细胞的生长。