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光学纯的（-）γ-内酰胺可用于合成碳环核苷类化合物,是重要的抗艾滋病药物阿巴卡韦的手性中间体。本文筛选获得具有高立体选择性和稳定性的（+）γ-内酰胺酶产生菌株，并研究其微生物全细胞催化不对称水解制备（-）γ-内酰胺。通过两步筛选法对土壤中的菌株进行筛选，以N-乙酰L-苯丙氨酸为底物进行初筛，对筛选出来的菌株进行拆分（±）γ-内酰胺能力的测定。经过手性HPLC检测，筛选出一株具有高立体选择性和酶活的（+）γ-内酰胺水解酶产生菌株。通过16s rRNA基因序列比对分析，鉴定该菌株为Delftia sp.，保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为Delftiasp. CGMCC No.5755。在摇瓶水平上考察了碳氮源、无机盐离子以及诱导剂等对Delftia sp.菌体生长和发酵产酶的影响，确定最适发酵培养基组成（g/L）：蔗糖30，蛋白胨30，牛肉膏25，乙酰胺5，MgSO41；最适培养条件为：温度30℃，初始pH7.0，接种量为1%。该菌株在优化的条件下发酵培养20h，酶活达到最大值692U/L，生物量2.74g/L。对Delftiasp.菌株进行了3L罐发酵培养，培养24h的菌体具有最佳的转化活力和较高的光学纯度，酶活达到最大值739U/L，生物量2.82g/L。对微生物催化不对称水解拆分（±）γ-内酰胺的条件进行了优化：最适pH范围为7.0-7.5，温度为35oC，摇床转速为180rpm，菌浓40g/L。当底物浓度为100g/L时，在优化条件下反应12h，e.e.值和产率分别为99.9%和53.7%，对映选择率E值可达99.2。考察了底物浓度对水解反应的影响，实验结果表明底物对细胞有抑制作用。通过分批添加底物可以减轻底物的抑制作用并提高底物的转化率。各种添加剂对水解反应没有明显的促进作用，有机溶剂对（+）γ-内酰胺酶的活性和立体选择性没有显著的影响。研究了利用新型双水相萃取体系对产物（-）γ-内酰胺进行提取。通过测定多种双水相体系的萃取能力，结果表明磷酸氢二钾/乙醇体系的萃取效果较好。对磷酸氢二钾/乙醇双水相体系的操作工艺进行优化，双水相体系中醇、盐的浓度对（-）γ-内酰胺的收率有显著的影响。当K2HPO4浓度为22%，乙醇浓度为19%，（-）γ-内酰胺回收率为96.95%，纯度为83.36%。为得到纯度较高的（-）γ-内酰胺，对其进行了有机溶剂萃取的研究，最终采用二氯甲烷对产物进行萃取，产物纯度达到97.48%。将反应体系放大到700ml，菌体浓度为40g/L，底物浓度为200g/L，底物分六次添加，反应30h。产物的e.e.值99.14%，转化率为54.82%，对映选择率E值为52.5。用等体积二氯甲烷萃取3次后，通过蒸发结晶，产生的淡黄色固体（-）γ-内酰胺，产物的回收率为79.56%。产物经HPLC检测，e.e.值和纯度分别为99.64%和94.35%。对纯化的产物进行核磁（NMR）鉴定确认其为（-）γ-内酰胺。