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观测水蛭注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响,探讨其神经保护作用机制。
方法:选用健康Wistar大鼠60只随机分为5组,分别为假手术组,生理盐水对照组,川芎嗪对照组,水蛭大、小剂量组,每组各12只。除假手术组外,其余四组均采用栓线法阻塞大鼠大脑中动脉,缺血2h再灌注22h,制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。分别于术前3天(每天一次),术前12小时,脑缺血2h后再灌注前,脑缺血再灌注损伤22h后给予腹腔注射生理盐水、川芎嗪、水蛭注射液。各组动物于脑缺血再灌注22h后,快速断头取脑,处死前分别采用5分制进行神经功能评分。对视交叉部冠状脑组织块行TTC染色,测定其吻端梗死面积百分比;视交叉前的脑组织块,制作脑部冠状切片,采用Hoechst染色法用荧光显微镜进行检测神经细胞凋亡,观察脑组织神经细胞凋亡的形态,计算脑组织神经细胞凋亡的百分率。
结果:与生理盐水对照组相比,治疗各组(水蛭大、小剂量组和川芎嗪组)均能降低损伤后大鼠神经功能评分,均可降低脑梗死面积百分比,亦均能降低再灌注损伤后脑组织神经细胞凋亡的百分率。与川芎嗪组相比,除水蛭小剂量组在脑梗死面积百分比方面无显著差异外(P>0.05),水蛭大、小剂量组在对大鼠再灌注损伤后的神经功能评分,及脑神经细胞凋亡率的影响方面有显著差异(P<0.01),尤以水蛭大剂量组为明显。
结论:水蛭注射液能改善大鼠脑缺血再灌注损伤的神经功能缺失,减少脑梗死面积,并能减低脑神经细胞凋亡的发生率,水蛭注射液对大鼠短暂性、局灶性脑缺血具有保护作用;这种神经保护作用在一定程度上与抑制神经细胞凋亡有关系。