【摘 要】
:
背景研究表明脂肪细胞在抵御细菌感染中起着重要作用,但是相关机制并不清楚。炎症小体是由胞浆内模式识别受体参与组装的多蛋白复合物,可以招募和激活促炎症半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶pro-caspase1,活化的caspase1可以切割IL-1β和IL-18使其成为成熟的细胞因子并引起细胞焦亡的发生。我们研究发现炎症小体受体分子NLRP6在脂肪细胞中的表达量最高,由于NLRP6在脂肪细胞感染细菌后所起的作
论文部分内容阅读
背景研究表明脂肪细胞在抵御细菌感染中起着重要作用,但是相关机制并不清楚。炎症小体是由胞浆内模式识别受体参与组装的多蛋白复合物,可以招募和激活促炎症半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶pro-caspase1,活化的caspase1可以切割IL-1β和IL-18使其成为成熟的细胞因子并引起细胞焦亡的发生。我们研究发现炎症小体受体分子NLRP6在脂肪细胞中的表达量最高,由于NLRP6在脂肪细胞感染细菌后所起的作用并不清楚,因此我们主要研究NLRP6在细菌感染脂肪细胞后所起的作用。目的通过研究在LTA刺激或感染沙门氏菌后,脂肪细胞内NLRP6的表达变化以及caspase1的活化,为脂肪细胞在沙门氏菌感染后所起的作用提供理论依据。方法1.将前脂肪细胞3T3-L1分化成为成熟脂肪细胞,用不同浓度沙门氏菌处理成熟脂肪细胞后,利用q PCR检测脂肪细胞中不同炎症小体受体分子的表达。2.将3T3-L1细胞分化为成熟脂肪细胞,用NLRP6的配体LTA处理后,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6以及其下游信号炎症因子的表达。3.用不同浓度的沙门氏菌处理脂肪细胞,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β和IL-18的表达,并检测进入细胞内的细菌载量和对细胞不同死亡方式的影响。4.构建NLRP6过表达质粒,转染3T3-L1分化的成熟脂肪细胞,用不同浓度的野生沙门氏菌处理细胞,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达,并检测进入细胞的细菌数量变化。5.分离NLRP6基因敲除小鼠和WT小鼠的原代性腺脂肪细胞,用野生沙门氏菌处理,利用q PCR、Western blot以及ELISA检测NLRP6、ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达,并检测进入细胞的细菌数量变化。结果1.不同浓度沙门氏菌处理成熟脂肪细胞后,炎症小体受体的表达量升高,其中以NLRP6的表达量升高最为明显。2.LTA刺激脂肪细胞后,NLRP6及其下游炎症因子ASC、caspase1、IL-1β、IL-18的表达明显增加,caspase1和IL-1β的表达与LTA呈剂量依赖关系。3.以不同浓度沙门氏菌感染脂肪细胞后,NLRP6的表达与细菌感染数量成正比,caspase1和IL-1β下游信号分子的表达量明显增加。4.NLRP6过表达后,用沙门氏菌感染成熟脂肪细胞,进入细胞内的细菌数量明显减少,其下游信号分子表达明显增加。5.敲除NLRP6后,用沙门氏菌感染成熟脂肪细胞,进入细胞内的细菌数量明显增加。结论1.沙门氏菌感染脂肪细胞后会高表达NLRP6以及一些其它的炎症小体受体分子。2.LTA被NLRP6识别并引起下游信号分子的表达增加。3.沙门氏菌激活脂肪细胞内的NLRP6在抵御沙门氏菌感染中起到了重要作用。
其他文献
背景我国目前老龄化趋势加剧,衰老相关神经退行性疾病的发病率及死亡率也逐渐增加。长时程增强(long term potentiation,LTP)是突触可塑性的重要表现形式,作为从突触水平反应学习和记忆功能的模型被广泛接受和应用。多巴胺(Dopamine,DA)是大脑中主要的神经递质,调节多种脑功能,与衰老、AD等疾病的认知功能缺陷有关,作为海马中表达最丰富的D2样受体,D4R增强了与学习和记忆功能
背景人类白细胞抗原-G(Human leukocyte antigen-G,HLA-G)是一种非经典的主要组织相容性复合体Ⅰ(MHC-Ⅰ)类分子。作为一个免疫耐受分子,HLA-G最初发现在胎盘滋养层细胞上,为孕妇胎儿提供免疫耐受,也促进移植物耐受,降低炎症反应和免疫应答,有利于肿瘤细胞和病毒发生免疫逃逸。前期我们的研究发现,HTLV-1病毒感染Hela等肿瘤细胞后,免疫耐受分子HLA-G出现高表达
背景冠心病因发病率、致残率、致死率高给家庭和社会带来沉重的负担。随着生活、行为方式的改变,社会竞争压力的增加,我国冠心病的发病呈现年轻化趋势。中青年人群是家庭和社会的中坚力量,知觉压力可引起中青年精神紧张甚至睡眠障碍而导致冠心病,而冠心病又会进一步加重其精神紧张及睡眠障碍,形成恶性循环。积极采取恰当的应对方式,降低患者对压力的应激反应,对于改善其睡眠质量显得至关重要。目的了解中青年冠心病患者知觉压
背景THA是目前骨科最为常见的手术之一,而DVT则被广泛认为可能是所有THA病人中严重而又普遍的并发症之一。基本预防、药物预防和物理预防是DVT预防的三大基石。物理预防当中GCS相较于其他物理预防方式,其优点在于易获得、经济安全、不影响患者活动等。但如何规范地应用GCS,已成为国内外医护专家关注的问题,而我国在GCS临床应用方面尚缺乏标准和规范,对于GCS的使用时长与持续性无明确标准。目的本研究通
背景急性缺血性脑卒中为最常见的卒中类型。由于患者对疾病的治疗和预后等不明确,易产生疾病不确定感,这种疾病体验会阻碍患者康复信心,影响其生活质量。生活质量是卒中后患者身心健康及社会适应的评价指标。研究证实疾病不确定感影响个体生活质量,但二者之间是否还受其他因素的影响目前尚不清楚。目的调查急性缺血性脑卒中患者疾病不确定感现状及其影响因素,构建疾病不确定感与急性缺血性脑卒中患者生活质量关系的中介效应模型
背景衰老是神经退行性疾病的主要危险因素,存在学习记忆减退与突触可塑性(long term potentiation,LTP)受损。LTP是一种突触可塑性的重要表现形式,依赖于AMPAR膜表达的持续增加、是反映认知功能的细胞模型。AMPAR跨膜转运蛋白γ8(TARPγ8)是LTP的关键调节蛋白,在突触的传递和LTP过程中起到了重要作用。其表达受钙调蛋白激酶II(Ca MCⅡC)与钙蛋白酶(Calpa
背景对于大多数原因导致的不育可以经过手术或药物进行治疗,但对于无精症或少精症患者而言,无法通过常规的治疗方法痊愈。近年来,间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSC)MSC由于其多能性和低免疫源性被广泛应用于再生医学,MSC可以分化为所有三个胚层的高级衍生物,例如骨骼,软骨,脂肪,肌肉等,而一些研究结果表明MSC具有分化为生殖细胞(Germ cell,GC)的潜能有望应用于不
背景自全面施行“二孩政策”以来,我国剖宫产率在不断提高。有研究显示,我国剖宫产率高居世界第一,各城市普遍在40%以上,个别地区剖宫产率甚至高达80%,远高于世界卫生组织(WHO)建议的10%~15%。疼痛作为术后最严重的并发症,日益引起临床工作者的重视。近年来,随着新型镇痛药物及镇痛技术的应用,极大地改善了患者术后疼痛问题,但是仍有很大一部分患者的术后疼痛缓解效果不佳,特别是剖宫产手术患者,术后疼
背景目前慢性失眠症患者的多方面的需求和当前的治疗手段单一成为慢性失眠症治疗过程中亟待解决的重点和难点。一方面,临床工作中接诊的慢性失眠症患者常常在焦虑、抑郁、疲乏及嗜睡等日间功能方面存在很多问题,需要给予基于评估的、综合的、系统的治疗。另一方面,目前治疗手段主要采用镇静催眠药物治疗,这并不能全面改善慢性失眠症患者的睡眠问题及失眠所伴随的日间症状。随着人们对睡眠的关注增加,对治疗效果及预后的要求越来
背景蛋白质泛素化是一种动态的多层次翻译后修饰,涉及真核生物的多种生物学功能。例如,基因转录,DNA修复,信号转导,自噬和细胞周期调控等。目前也有数据表明,泛素化修饰通过靶向关键蛋白在信号转导途径中的活性,稳定性,亲和力和位置,在宿主抗病毒固有免疫应答中发挥重要的功能。而病毒诱导的信号接头蛋白(Virusinduced signaling adaptor,VISA)是RIG-I样受体(RIG-I l