论文部分内容阅读
目的:观察不同周数跳跃训练及抗炎干预对兔髌腱及腱止点组织学,免疫组化,实时荧光定量PCR等指标的变化,探讨负荷积累量与抗炎干预对髌腱及腱止点结构变化、炎症反应相关蛋白、细胞外基质合成与降解相关蛋白及自噬相关蛋白的影响,观察布洛芬抗炎药预防腱病的效果,并揭示其作用机理。方法:68只雌性新西兰大白兔(体重2.46±0.11kg)随机分为4组,即空白对照组CON,跳跃训练组OJ,跳跃加抗炎药组JAD以及抗炎药组OAD,各组又按时间不同分为2周,4周,6周及8周组。其中研究一仅涉及腱止点,研究二仅涉及髌腱,研究三涉及二者之间的关系。跳跃训练采用三维测力台记录起跳、落地峰值力及冲量,分别于对应的时间点取材,腱止点标本行HE、番红及免疫组化染色,髌腱行免疫组化及RT-PCR。观察指标包括纤维软骨带厚度、细胞密度,细胞因子TNFα、HMGB1、MMP-1、MMP-2、Beclin-1、LC3B、IL-1β、COX-2、PTGES2、COL-I、COL-III;其中腱止点检测所有指标的蛋白表达,髌腱样本仅检测后5个指标的蛋白及mRNA表达量。结果:(1)不同周数跳跃训练后经体重标化的生物力学结果显示,OJ4W组的起跳冲量显著低于OJ2W组(P=0.005);(2)组织学结果显示,与相同时间点的CON组相比,OJ组随跳跃训练周数的变化依次呈现出以下变化规律:腱止点处细胞密度增大,纤维软骨带增厚,潮线模糊或消失,细胞形态改变,分布不均,骨腱结合部固有的分层结构消失,偏振光下胶原波浪形结构消失、排列不连续;番红染色下粘多糖蛋白异常增多维持在一定的水平上;(3)免疫组化结果显示,与相同时间点的CON组相比,OJ2W、OJ4W组TNFα、IL-1β、COX-2、PTGES2、MMP2显著升高(P<0.05),OJ6W组IL-1β、COX-2、MMP2、COL-III显著升高(P<0.05),OJ8W组IL-1β、COX-2、COL-I显著升高但MMP1、Beclin显著降低(P<0.05);与同时间点的OJ组相比,JAD2W组COX-2、PTGES2、MMP2显著降低(P<0.05),JAD6W组MMP1、COL-I、COL-I/COL-III、LC3B抗炎干预对兔髌腱及止点损伤形成的影响显著降低(P<0.05),JAD8W组HMGB1、MMP1、COL-I、LC3B显著降低(P<0.05)。结论:(1)髌腱及止点结构、炎症因子变化关系密切。TNFα、IL-1β、MMPs、COL-I、COL-III等蛋白表达具有一定的时序性规律。(2)早期存在一定程度的炎症反应是有益的,而持续存在的炎症反应是对机体不利的。(3)抗炎干预具有较好的短期效应,集中体现在早期有助于缓解炎细胞浸润及保护胶原蛋白,但长期效应来看,仅能提前机体修复反应的时间点,对最终的愈合质量帮助不大。(4)髌腱对载荷的承载能力明显大于腱止点,可以解释腱止点损伤多于肌腱的原因。