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杜仲是我国分布比较广泛,种植面积较大的一种经济类作物。其叶资源非常丰富,研究表明杜仲叶的化学成分与皮相似,且绿原酸含量丰富,是它的主要活性成分。本文通过研究杜仲叶多酚提取物对瘦肉型猪肉品质的改良作用,及其主要活性成分绿原酸对肝-肠道损伤的保护作用,并从调节机体能量生成的角度探索其可能的作用机理,为酚酸类化合物调节代谢平衡,改善亚健康状态,提供理论支撑,有利于提高杜仲叶综合开发利用率。第一部分:杜仲叶多酚提取物对肥育猪肉品质的影响。选取体重为50kg左右的杜×长×大肥育猪,随机分为两组:正常对照组(饲喂基础日粮)和杜仲叶多酚提取物组(添加0.08%杜仲叶多酚提取物的基础粮)。相对于正常对照组,杜仲叶多酚提取物能显著提高肥育猪的体重,降低料肉比。干预30天后,血清总蛋白和肌酐水平显著升高,60天后血清白蛋白,总蛋白,和肌酸的水平显著升高,甘油三酯的含量显著降低。背最长肌的肉质得到改善,肌肉的亮度,黄度,肌内脂肪含量和肌纤维密度显著升高,而肌纤维的直径显著降低。通过对肝脏,背最长肌和背部脂肪中与脂肪酸代谢相关酶,以及肌纤维类型mRNA水平的表达,探索杜仲叶多酚提取物对肥育猪肉质改善作用的可能机理。研究结果显示,杜仲多酚提取物能提高肝脏LPL和AMPKmRNA的表达显著升高,降低HSL, ACC, FAS,和PPAR-ymRNA的表达低;提高背最长肌AMPK mRNA水平;降低LPL, FABP-4, FATP-1,和PPAR-γmRNA的表达;提高背部脂肪组织AMP mRNA的表达,降低HSL, LPL, FAS,和FABP-4的mRNA表达。Ⅰ型纤维在杜仲多酚提取物背最长肌中mRNA的表达显著升高,Ⅱb型纤维的表达显著降低。以上研究结果表明,杜仲多酚提取物能提高肥育猪饲料利用率,改善背最长肌的猪肉品质,其对肉质的改善作用与调节机体脂肪酸代谢和肌纤维类型有关。第二部分:绿原酸对慢性内毒素应激大鼠肝-肠损伤的缓解作用绿原酸是杜仲叶含量最高的一种酚酸,在膳食中普遍存在。内毒素是生物体肠道内大量存在的一类抗原,易通过肠道屏障而进入血液循环,因此机体极容易受到内毒素的侵袭。接下来我们以慢性内毒素应激大鼠为研究对象,探索绿原酸对肝脏和肠道损伤的缓解作用。1、绿原酸对慢性内毒素应激大鼠生长性能的影响。绿原酸能抑制慢性内毒素应激大鼠造成的体重增加,降低食物利用率。和慢性内毒素应激组相比,绿原酸干预后,肝脏,内脏脂肪,脾脏和胸腺的相对重量显著降低,同时内脏脂肪的面积降低了25.24%,具有显著差异性。2、绿原酸缓解慢性内毒素应激大鼠肝脏损伤。和慢性内毒素应激组相比,绿原酸干预后血清总胆红素含量、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力,以及肝组织髓过氧化物酶的活力显著降低,且肝脏的形态结构趋于正常。这一结果暗示绿原酸能缓解肝脏损伤。能量生成障碍是造成肝损伤的重要因素。和慢性内毒素应激组相比,绿原酸干预后,肝脏线粒体的脂质过氧化程度降低,ATP的含量和腺苷酸池(ATP+ADP+AMP),以及AMP/ATP的比值分别增加了22.65%,30.51%,和45.69%,具有显著差异性。进一步研究发现,绿原酸干预后与糖无氧酵解相关的酶的活力(己糖激酶,丙酮酸激酶,乳酸脱氢酶)及乳酸含量的显著降低;丙酮酸脱氢酶,柠檬酸合成酶,NADH脱氢酶,琥珀酸脱氢酶,和ATPase的活力显著增强。绿原酸能促进慢性内毒素应激大鼠肝脏与线粒体生物合成关键蛋白(5’-AMP激活性蛋白激酶,过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α,核呼吸因子1,和线粒体转录因子A) mRNA的表达,以及5’-AMP激活性蛋白激酶的磷酸化。综上,绿原酸能通过促进线粒体的生物合成,增强线粒体氧化磷酸化水平,提高葡萄糖的有氧氧化,降低葡萄糖的无氧酵解,从而促进肝脏ATP的生成,缓解慢性内毒素应激大鼠造成的肝脏损伤。3、绿原酸调节慢性内毒素应激大鼠肝脏的脂肪代谢。研究结果显示,绿原酸能显著抑制慢性内毒素应激造成的血清甘油三酯和游离脂肪酸含量的升高。绿原酸干预后肝脏甘油三酯和胆固醇的含量降低,乙酰辅酶A羧化酶的含量、脂肪酸合成酶的含量和活力显著降低;肉碱脂酰转移酶1的含量和活力,以及脂肪酸的p-氧化显著增强。通过气相色谱对脂肪酸的组成进行分析,结果显示绿原酸干预后C 18:3n-3的比例显著增加,C183n-6,C20:1,和C24:1的比例,Δ6和Δ9-18脱氢酶活力显著降低。综上,绿原酸能通过抑制肝脏脂肪酸合成,促进脂肪酸的氧化,调节脂肪酸的组成,缓解慢性内毒素应激大鼠造成的肝脏脂肪代谢紊乱。4、绿原酸缓解慢性内毒素应激大鼠肠道损伤。肠道通透性的增加是内毒素进入机体内环境的重要途径。和慢性内毒素应激组相比,绿原酸能显著降低乳果糖/甘露醇的比值,回肠损伤评分,和回肠髓过氧化物酶的活力。回肠组织碱性磷酸酶的活性,总抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活力显著增强,回肠组织和线粒体丙二醛的含量显著降低。同时线粒体NADH脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的活力显著增强。肠道通透性与线粒体脂质过氧化呈正相关,与NADH脱氢酶的活力呈负相关。综上,绿原酸能通过降低肠道线粒体在脂质过氧化程度,提高NADH脱氢酶的活力,降低肠道通透性,缓解慢性内毒素应激造成的肠道损伤。以上结果研究表明,绿原酸能缓解慢性内毒素应激造成的肝-肠损伤,其缓解作用与促进线粒体氧化供能有关。